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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组 质粒在BL21表达
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wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-30 12:56:06:
请问楼主解决这个问题了吗  想听下文

想听呀 呵呵呵  您说说吧
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11楼2011-03-30 17:09:32
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_然然

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-03-30 17:09:32:
想听呀 呵呵呵  您说说吧

刚开始做原核表达 用的是pet-20b载体，转BL21，连单菌落也不长 很是郁闷，随想听听你的看法 呵呵
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12楼2011-03-31 08:33:42
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wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by _然然 at 2011-03-31 08:33:42:
刚开始做原核表达 用的是pet-20b载体，转BL21，连单菌落也不长 很是郁闷，随想听听你的看法 呵呵

我用的载体PET21a，双酶切之前，因为我用的是nde1和sal1这两个酶切位点，nde1不好被切开，我于是把PET21A放到了JM110中，然后提质粒，然后再切开的。
然后我观察了我的目的片段序列，发现它有稀有密码子，所以换了表达载体，用的是Transtter de3 这个表达载体，所以我的菌长的可以也有活性
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13楼2011-03-31 11:05:23
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