应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组 质粒在BL21表达
131/2返回列表12下一页
查看: 1730  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wsz2056

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组 质粒在BL21表达 已有8人参与

重组质粒，为什么在BL21 中表达不出来，IPTG1M，终浓度0.5，诱导时间过夜，温度20-25度个不等 ，但是就是不表达。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-03-14 15:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenshuai1238

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对质粒进行鉴定了吗？重组是否成功？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-14 16:20:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不表达的因素很多，如ORF、密码子偏爱性等等。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-14 16:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qjy_134

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-03-14 17:57:04
先用Rosetta 试一下，如果还不行就换个载体。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-03-14 17:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
具体什么原因不是很清楚
只是给点建议吧，你的IPTG的0.5单位是什么？这个东西浓度不能太高，一般作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
还有就是你的培养温度为什么那么低呢？这样的温度可以时间再稍微长点
赞一下(1人) 回复此楼
严于律己，宽以待人
5楼2011-03-14 19:17:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 最爱花诗雨 at 2011-03-14 19:17:50:
具体什么原因不是很清楚
只是给点建议吧，你的IPTG的0.5单位是什么？这个东西浓度不能太高，一般作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。
还有就是你的培养温度为什么那么低呢？这样的温度可以时 ...

知道了  谢谢
回复此楼
6楼2011-03-15 10:43:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by chenshuai1238 at 2011-03-14 16:20:37:
对质粒进行鉴定了吗？重组是否成功？

成功了
谢谢诶
回复此楼
7楼2011-03-15 10:43:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
培养基里有糖的成分吗?如果有糖会抑制表达。如果基因中稀有密码子比较多也容易导致无法表达。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-03-15 10:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也碰到这样的问题，不过不是不表达，而且表达量很低很低，以前还好好的
赞一下(1人) 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
9楼2011-03-15 13:32:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

_然然

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问楼主解决这个问题了吗  想听下文
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-03-30 12:56:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wsz2056 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +12 enenenhui 2026-03-13 13/650 2026-03-16 08:30 by Linda Hu
[考研] 化学工程321分求调剂 +6 大米饭！ 2026-03-15 6/300 2026-03-16 07:58 by wang_dand
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分，求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 0805，333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭