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【求助】HPLC菜鸟求助
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陈思容
铜虫
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【求助】HPLC菜鸟求助
最近做高效液相,分离的效果不好;样品用DMSO溶解后加40%乙腈;流动相为40%乙腈。出峰效果总不是很好,求各位支招。rentime 7.418那个是我要的东东,用的是Agilent1200的仪器,Apollo c18的柱子(Alltech)
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2011-03-14 13:43:36
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qiqicharlotte
银虫
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼
:
Originally posted by
selina093
at 2013-06-28 16:31:50
样品能用流动相溶解最好了,为什么还要DMSO先溶解
单纯流动相溶解进样谱图只有一个峰,而用DMSO溶解进样的色谱图有那么多杂峰,这就说明这个溶剂对谱图干扰很大...
因为做细胞代谢的话都是用DMSO 作溶剂的,后面还要对代谢物进行研究,所以DMSO 是迟早要碰上的。 最近的实验打算只用流动相溶解,但是化合物对pH 太敏感了,所以保留时间总是不稳定...惆怅啊...
所以DMSO 很尴尬...
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13楼
2013-06-28 23:12:19
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karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-03-14 21:18:03
陈思容(金币+1): 2011-03-15 12:30:45
第一你这个基线跑得还不太平
第二你要的这个东西响应值太低,可以通过改变流动相的PH值来调节,或者加缓冲盐。在检测范围允许下还可以加大一点浓度。
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2楼
2011-03-14 14:10:23
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乙酰水杨酸
木虫
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★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-03-14 21:18:39
波长貌似选的不好,峰高很低,另外建议DMSO用量要少,否则影响分离效果
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4楼
2011-03-14 14:57:26
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痴夷子皮
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karl2100(金币+1): 谢谢指教! 2011-03-14 21:18:19
陈思容(金币+5): 2011-03-15 09:45:15
1、检测波长没选好,响应值太低了。可以查资料或扫紫外,确定检测波长;
2、改用缓冲液流动相调节pH(磷酸、三乙胺),改善峰型调整保留时间。。。;
3、流动相含DMSO么?若无而样品溶液有,会造成溶剂效应,改用流动相溶解样品或增加DMSO中样品浓度,以减少溶于40%乙腈中样品含DMSO的量,DMSO长期使用液相管路易老化,不建议流动相加DMSO;
4、梯度。。。
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5楼
2011-03-14 18:51:46
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