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【求助】HPLC菜鸟求助
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陈思容
铜虫
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【求助】HPLC菜鸟求助
最近做高效液相,分离的效果不好;样品用DMSO溶解后加40%乙腈;流动相为40%乙腈。出峰效果总不是很好,求各位支招。rentime 7.418那个是我要的东东,用的是Agilent1200的仪器,Apollo c18的柱子(Alltech)
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痴夷子皮
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karl2100(金币+1): 谢谢指教! 2011-03-14 21:18:19
陈思容(金币+5): 2011-03-15 09:45:15
1、检测波长没选好,响应值太低了。可以查资料或扫紫外,确定检测波长;
2、改用缓冲液流动相调节pH(磷酸、三乙胺),改善峰型调整保留时间。。。;
3、流动相含DMSO么?若无而样品溶液有,会造成溶剂效应,改用流动相溶解样品或增加DMSO中样品浓度,以减少溶于40%乙腈中样品含DMSO的量,DMSO长期使用液相管路易老化,不建议流动相加DMSO;
4、梯度。。。
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2011-03-14 18:51:46
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karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-03-14 21:18:03
陈思容(金币+1): 2011-03-15 12:30:45
第一你这个基线跑得还不太平
第二你要的这个东西响应值太低,可以通过改变流动相的PH值来调节,或者加缓冲盐。在检测范围允许下还可以加大一点浓度。
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2011-03-14 14:10:23
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木虫
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★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-03-14 21:18:39
波长貌似选的不好,峰高很低,另外建议DMSO用量要少,否则影响分离效果
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2011-03-14 14:57:26
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陈思容
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引用回帖:
Originally posted by
痴夷子皮
at 2011-03-14 18:51:46:
1、检测波长没选好,响应值太低了。可以查资料或扫紫外,确定检测波长;
2、改用缓冲液流动相调节pH(磷酸、三乙胺),改善峰型调整保留时间。。。;
3、流动相含DMSO么?若无而样品溶液有,会造成溶剂效应,改 ...
流动相中不含DMSO,样品溶液里面有的;
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6楼
2011-03-15 09:48:11
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