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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】胶回收没条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zwlr116812

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】胶回收没条带 已有2人参与

PHY300PLK是穿梭载体，我用BamHI和HindIII双酶切PHY300PLK,PQE-gfp,目的是把GFP连到PHY300PLK上，然后转到大肠杆菌的感受态里面去。但目前我只是双酶切后，用5微升检测，能看到酶切完全有很亮的条带，然后我进行胶回收，切胶时的条带也很亮，回收完后再检测就啥也没有了，已经连续做的三次，都是同样的结果。后来怀疑是试剂盒的问题，就回收了下其他的一个片段，结果那个片段的回收效果很好。所以现在百思不得其解，请各位高手指点迷津。
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1楼 2011-03-11 09:49:42
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
胶回收效率会降低，楼主做了许多次应该排除了操作手法这方面的原因了。再仔细想想有没有那个环节遗漏了没有考虑，可能是某个微小的原因呢。希望楼主早日成功
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2楼2011-04-01 17:11:23
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LeVan2008

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
回收的时候，你把第一步的溶胶溶液倒到提取质粒的那种吸附柱试一下，然后再继续下面的实验……就是不要用原来试剂盒的那个吸附柱，用质粒吸附柱代替
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3楼2011-05-24 17:54:25
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