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天鸟木虫 (正式写手)
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[交流]
【交流】有机污染物降解菌的筛选方法讨论 已有7人参与
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我最近也是做有机污染物降解菌的筛选 首先我想讲一下基本的筛选过程 首先我觉得有机物污染物需要用助溶剂溶解它,像丙酮,等。实验的时候,我觉得你最好是先将瓶子灭菌后,再加入丙酮和PCBs的混合液,静止后,待丙酮挥发后,再加入你的无机盐培养基(丙酮挥发的过程,可以放在超净台中挥发,或者是用胶塞塞住后,拿在摇床中摇段时间就会挥发掉丙酮。)然后加入泥样 需要注意的是 1,培养基中的水最好使用的是超纯水,因为普通的水,里面极有可能会里面含有有机物,从而影响后面的实验过程。 2,瓶子最好要保证没有有机物在里面,因为这会影响是不是菌利用的就是 你要的那种有机污染物。 现在其实我也碰到个问题就是我在分菌的时候,其实基本是按照我自己上述说的过程去进行的,但是后面分的菌,居然会在对照中(加入等量的助溶剂其中不含我的要的有机污染物,挥发完助溶剂后后,再加培养基)有些菌会生长。有些在对照会长,有些在对照比实验组长的更好。这些结果很费解。我现在主要认为是外界碳源对于实验造成的影响。大家有没有碰到类似的问题呢,希望大家积极讨论呀! 说明的是我的菌已经经过纯化了,是纯菌,只不过没有鉴定而已 最近得出的结论是我试验很可能是由于助溶剂甲苯只是分析纯的,不是HPLC级别的,使得分析纯的甲苯可能含有些杂志有机物,使得菌能在对照长 [ Last edited by 天鸟 on 2011-3-16 at 17:24 ] |
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