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lanqianer

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教DNA溶液的配制

请教DNA溶液的配制方法

我们需要的是0.01g/ml的DNA溶液
但是因为DNA是絮状的
水溶性不是很好
每次配的DNA溶液底部都有粘稠物

请教虫友们有没有什么配制DNA的好方法

谢谢！
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1楼 2011-03-10 09:15:08
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
看天(金币+1): 鼓励 2011-03-10 10:28:37
lanqianer(金币+2): 2011-03-21 19:31:39
引用回帖:
Originally posted by lanqianer at 2011-03-10 09:15:08:
请教DNA溶液的配制方法

我们需要的是0.01g/ml的DNA溶液
但是因为DNA是絮状的
水溶性不是很好
每次配的DNA溶液底部都有粘稠物

请教虫友们有没有什么配制DNA的好方法

谢谢！

这么浓啊，100mg/ml。你看到过有文献上这么做的么？我怀疑水分子都不够这么多DNA分子结合的。。。
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2楼2011-03-10 09:41:12
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-10 10:28:48
lanqianer(金币+4): 2011-03-11 08:40:18
lanqianer(金币+3): 2011-03-21 19:32:00
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-10 09:41:12:
这么浓啊，100mg/ml。你看到过有文献上这么做的么？我怀疑水分子都不够这么多DNA分子结合的。。。

10 mg/mL.
不过这个浓度还是相当的高啊。
相当于引物母液浓度还要浓缩10倍的概念。
不知道你的DNA有多大的量，如果量不大的话，我怀疑几uL的Elution怎么加进去？
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3楼2011-03-10 10:13:20
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-10 10:13:20:
10 mg/mL.
不过这个浓度还是相当的高啊。
相当于引物母液浓度还要浓缩10倍的概念。
不知道你的DNA有多大的量，如果量不大的话，我怀疑几uL的Elution怎么加进去？

， 数学没学好，我去找小学三年级的数学书了。。。
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4楼2011-03-10 12:16:16
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cjl2fl

金虫 (正式写手)
浓度太高了
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5楼2011-03-10 13:15:38
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-10 09:41:12:
这么浓啊，100mg/ml。你看到过有文献上这么做的么？我怀疑水分子都不够这么多DNA分子结合的。。。

我们师姐是用的这个浓度
那一般都是配多大浓度
我就是感觉不怎么溶呀
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6楼2011-03-10 15:26:51
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-10 10:13:20:
10 mg/mL.
不过这个浓度还是相当的高啊。
相当于引物母液浓度还要浓缩10倍的概念。
不知道你的DNA有多大的量，如果量不大的话，我怀疑几uL的Elution怎么加进去？

我们用的是小牛胸腺DNA
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7楼2011-03-10 15:27:42
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cjl2fl at 2011-03-10 13:15:38:
浓度太高了

请问一般是配多大浓度的啊？
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8楼2011-03-10 15:28:14
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
lanqianer(金币+3): 2011-03-21 19:31:24
引用回帖:
Originally posted by lanqianer at 2011-03-10 15:26:51:
我们师姐是用的这个浓度
那一般都是配多大浓度
我就是感觉不怎么溶呀

浓度是根据你要做什么实验来定的啊。。。
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9楼2011-03-10 16:29:05
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-10 16:29:05:
浓度是根据你要做什么实验来定的啊。。。

像小牛胸腺DNA分子量一般多大呢
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10楼2011-03-10 18:54:39
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
lanqianer(金币+8): 2011-03-11 08:40:30
引用回帖:
Originally posted by lanqianer at 2011-03-10 18:54:39:
像小牛胸腺DNA分子量一般多大呢

总DNA 大小至少应 23kb吧，所以分子量就是 23,000* 333.我数学学得不好，你自己乘一下。
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11楼2011-03-10 19:03:40
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-10 19:03:40:
总DNA 大小至少应 23kb吧，所以分子量就是 23,000* 333.我数学学得不好，你自己乘一下。

我看有人配成0.01mol/L的浓度，但是买的DNA上面没写分子量
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12楼2011-03-11 08:41:14
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
可以试试te缓冲液溶解
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13楼2011-03-11 11:29:03
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lanqianer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-11 11:29:03:
可以试试te缓冲液溶解

那和溶液性没关系吧，只是能延长DNA存放的时间
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14楼2011-03-14 12:22:26
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LOVEIS

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by lanqianer at 2011-03-10 15:27:42
我们用的是小牛胸腺DNA...

我最近也要配小牛胸腺DNA，要的浓度大概是0.5ug/ul ,想请教一下你们是怎么配的？我买的是固体的，一管大概是50mg
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15楼2014-03-19 18:39:11
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
弱碱性环境有利于DNA溶解，溶解之后可以很方便的用buffer恢复到所需的pH，比如TRIzol中提DNA的部分就建议DNA沉淀首先在弱NaOH中过夜，待溶解之后再调pH。
Resuspending in weak base is HIGHLY recommended since isolated DNA does not resuspend well in water or in Tris buffers. The pH of the 8 mM NaOH is only ~9 and should be easily adjusted with TE or
HEPES once the DNA is in solution.
可供参考。
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16楼2014-03-19 20:44:42
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