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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pDG148-stu

本人现在需要以pDG148-stu为载体构建一个重组质粒，我查了一些资料，发现资料上设计的引物不含酶切位点，而载体是需要stuI酶来处理的，那怎样将目的基因和载体连接？哪位高手知道关于这个载体的信息，请大家都帮帮忙，拜托了！
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1楼 2011-03-09 17:46:37
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-09 19:39:28
首先找到载体的图谱，带酶切位点的最好，然后设计你目的基因的引物，连接即可！
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2楼2011-03-09 18:34:25
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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-09 18:34:25:
首先找到载体的图谱，带酶切位点的最好，然后设计你目的基因的引物，连接即可！

我查的资料上说是PCR产物和酶切后的载体都要用T4DNA聚合酶处理，然后连接，这是一个不依赖连接酶的克隆过程，关于这方面你了解更详细的内容吗？非常感谢！！
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3楼2011-03-10 10:16:57
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farmerxu

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
pDG系列是个奇怪的东西，很多文献都提到了，就是找不到序列。
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4楼2014-09-22 18:20:22
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