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50528061

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC有鬼峰出现,急寻解决方案已有40人参与

A相是25mmol KH2PO4水溶液,B相是乙腈,方法为0-5min,5%B;5-12min,5%-60%B;12-24min,60%B;24-34min,5%B。
   岛津四元泵,检测器为PDA的,每次都会在14.5min出现鬼峰(检测波长为210nm)
    走空白也有,重新配缓冲盐仍然有,关键换柱子走空白也有此峰出现(出峰时间不一样,峰型大致一致),更换缓冲盐为去离子水走空白,基线平稳。
    首先考虑是流动相出了问题,但缓冲盐是每天重新配,0.22um的膜过滤后超声,每天走样之前首先走空白,峰高时高时低,重要的是中间产物的峰就出在14.5min,鬼峰和主峰的紫外吸收不一样,很明显包在主峰里面了,很苦恼,找不到原因在哪。
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wulinwulin

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 50528061 at 2011-03-05 11:10:51:
有机相是用的HPLC级乙腈,默克的;样品都过滤过,你说的滤膜,我也考虑过的,换了盒新的滤膜过滤水相,连厂家都换了,没效果!

楼主,你还没有考虑过是不是柱子的原因,你换根色谱柱看看还会不会有鬼峰
希望能和分析化学专业和其他专业的人成为朋友
25楼2011-03-10 09:50:24
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
pplover(金币+1): 感谢分析。。 2011-03-05 21:24:23
一、鬼峰:既不是主峰,也不是杂质峰,是不能说明其来源的峰.!
出现原因:
1.柱吸附样品,随后解吸  2.注射器污染  3.样品量太大  4.进样技术差
......

业余的表示柱子既然没问题,难道是注射器的问题?!
努力奋斗!!!
2楼2011-03-05 10:29:15
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50528061

金虫 (小有名气)

进样系统的污染是可以排除的吧,走空白根本就没进样呀
3楼2011-03-05 10:33:07
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
喔!我是做质谱的对此也不大了解就是上课时听过一些!坐等高人了
努力奋斗!!!
4楼2011-03-05 10:37:39
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