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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 学术实验 » 求助HPLC问题!一个很菜的问题!
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hailang_zj

荣誉版主 (职业作家)

优秀版主

[交流] 求助HPLC问题!一个很菜的问题!

偶现在正做HPLC实验,偶想请教大家一个问题,我的标准品的出峰时间是大约20分钟,样品待测成分当然也是,请问,我进样品后,是不是要等到所有的峰出来以后,我才能进第二针样品,我发现等到所有的峰出来会花上1.5小时甚至更多,不知道应该如何做才算正确的操作?是否有必要等到所有的峰出来?


给小木虫和各位虫友的一封感谢信!

在这一两个月的时间里,我从HPLC的ABC开始学起,从HPLC的连续在心爱的小木虫发了三篇有关HPLC的求助帖,
http://muchong.com/bbs/viewthread. ... ge=1&highlight=
http://muchong.com/bbs/viewthread. ... ge=1&highlight=
http://muchong.com/bbs/viewthread. ... ge=1&highlight=

      在这次实验中,我可是遇到了很多意料中与意料外的问题,但这也使得我有更多学习的机会,也得到了很多虫友的指导,有的虫友甚至以亲身经历来告知,我学到了很多有关HPLC的知识,也学到了遇到问题时,如何分析问题和解决问题的,从一个HPLC盲成为一个懂得一点道道的人,当然,我还会继续的向大家学习,活到老,学到老,嘻嘻!我想,这将会是一次难忘的经历!对于我来说!
       现在实验已经完成,从结果来看还满意!
       我衷心的感谢大家给我的支持和帮助!
       太多的虫友应助了(第一个网站地址),我也不知道给谁好!
       想了想,就给金笔最少的虫友吧,希望大家不要有意见,斑竹也能谅解,我会尽我所能上传更好更多的东西来小木虫,也会在自己力所能及的范围内帮助他人,助人为乐!

[ Last edited by hailang_zj on 2006-8-13 at 13:10 ]
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1楼 2006-08-10 17:31:40
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xiaoxiaoma001

荣誉版主 (文坛精英)

水区小兔
★ ★
zhaoyusnow(金币+2):谢谢参与。欢迎常来。
当然有必要等到所有的峰出来啦！！否则上一针的残留并入下一针，到底hplc纯度结果如何，两针相差很大的话，怎么判别呢！！
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上帝说：要有光，于是便有了光......人只不过是一根苇草,是自然界最脆弱的东西;但他是一根能思想的苇草！
2楼2006-08-10 17:35:44
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可可西里

木虫之王 (文学泰斗)

甾体者说
★ ★
zhaoyusnow(金币+2):谢谢参与。欢迎常来。
应该等到第一针里边的东西全出来才能进第二针的

不然有干扰的
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3楼2006-08-10 17:43:37
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可可西里

木虫之王 (文学泰斗)

甾体者说
这个不应该问的
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求助文献下载后，及时评分和EPI。
4楼2006-08-10 17:44:36
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wwhong7217

金虫 (小有名气)
有干扰就得等所有的峰出完再进样
极性相差很大，应该可以纯化一下样品
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5楼2006-08-10 17:51:20
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可可西里

木虫之王 (文学泰斗)

甾体者说
引用回帖:
Originally posted by wwhong7217 at 2006-8-10 05:51 PM:
有干扰就得等所有的峰出完再进样
极性相差很大，应该可以纯化一下样品

有干扰就要等出来啊

如果有其他的好的方法也可以
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求助文献下载后，及时评分和EPI。
6楼2006-08-10 17:54:43
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cg781025

金虫 (初入文坛)
看你是做什么项目了！
如果是含量的话，无关紧要，影响不大；
如果是有关物质，就只能等了，如果可能的话，改改条件（走梯度之类）使后面的杂质尽快出峰
赞一下 回复此楼
7楼2006-08-10 18:32:48
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hailang_zj

荣誉版主 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by cg781025 at 2006-8-10 06:32 PM:
看你是做什么项目了！
如果是含量的话，无关紧要，影响不大；
如果是有关物质，就只能等了，如果可能的话，改改条件（走梯度之类）使后面的杂质尽快出峰

方法学已经建立,我的目的是做含量测定

"有关物质"指的是什么意思?能详细的解释一下吗?
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8楼2006-08-10 18:48:27
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llltt

铜虫 (正式写手)
★ ★
zhaoyusnow(金币+2):谢谢参与。欢迎常来。
样品的东西肯定要出完，等待的时间太长的话就影响效率，我建议楼主在标准物出峰以后改变流动相的比例，增加有机相的比例，使本来1.5h出完的峰（样品出完以后的杂峰）在10－20分钟出完，这样不会影响后面的测量，不过第二针的时候要平衡好了以后再进！
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9楼2006-08-10 20:07:51
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ypll1971

木虫 (正式写手)
建议用梯度洗脱。这样可全部出峰，分离时间也短。
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10楼2006-08-11 05:55:56
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