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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】真菌分子鉴定问题
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-02-27 16:13:39:
PCR完了之后跑电泳，看到有想要的产物产生，就将PCR产物送去测序。你们实验室没人做过？

我们实验室就我做分子的
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11楼2011-02-27 17:27:05
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-02-27 16:13:39:
PCR完了之后跑电泳，看到有想要的产物产生，就将PCR产物送去测序。你们实验室没人做过？

再请教一下：电泳时用TAE还是TBE好些?关于真菌分子鉴定~多谢！
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12楼2011-02-28 10:52:45
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3): 很详细，感谢淀粉酶~· 2011-02-28 14:09:59
这个我没想过，一直用TAE，因为我懒得配，就借别人的，别人刚好有的是TAE母液我就用TAE了。我不知道用TBE效果会怎样，但是用TAE是可以的。

PCR完了之后跑电泳，看到有想要的产物产生，就将PCR产物送去测序。意思是假如说一个PCR体系是一共25微升的，PCR完了之后就取2微升电泳，看到在大约600bp处有条带，就将剩下的23微升送去测序，测序单上写明PCR未纯化，表示让他们来纯化。可能23微升还达不到测序要求的量，那就做多几管得到大量，如果浓度不够高就真空蒸发提高浓度。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2011-02-28 14:00:04
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-02-28 14:00:04:
这个我没想过，一直用TAE，因为我懒得配，就借别人的，别人刚好有的是TAE母液我就用TAE了。我不知道用TBE效果会怎样，但是用TAE是可以的。

PCR完了之后跑电泳，看到有想要的产物产生，就将PCR产物送去测序。意 ...

太感谢了！
再请教一个问题：缓冲液中的去离子水可以用蒸馏水代替吗？
上样缓冲液有什么要求没？
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14楼2011-02-28 15:07:36
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
缓冲液中的去离子水可以用蒸馏水代替，蒸馏水没多少离子的

上样缓冲液没有什么要求，按照说明书配置就行
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
15楼2011-02-28 17:56:28
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-02-28 17:56:28:
缓冲液中的去离子水可以用蒸馏水代替，蒸馏水没多少离子的

上样缓冲液没有什么要求，按照说明书配置就行

那上样缓冲液随便买哪个都行？
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16楼2011-02-28 19:06:57
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zhangchandyf

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我都作BLAST了，可是出来百分百同源性的有好几个菌，怎么办？
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存在即合理！！！
17楼2011-03-05 17:06:04
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