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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】限制性核酸内切酶
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】限制性核酸内切酶 已有4人参与

我想研究一下一个DNA结构中间loop区的作用，有好几个loop区，想找一种限制性DNA内切酶，可以选择性地切割DNA单链，这样可以研究loop区的作用，而不是那种从末端开始切起的内切酶，请问哪位可以提供商品化酶的信息，不胜感激！
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1楼 2011-02-20 13:57:20
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
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很多卖 限制性内切酶的啊， NEB的 ，Fermentas的比较好用。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-20 13:59:20
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)

找了，没有找到合适的，可能我遗漏了，谢谢
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3楼2011-02-20 14:13:00
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xmy0523

新虫 (小有名气)
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-02-20 14:53:06

突然有个想法，你的loop有多长，如果知道序列的话，可不可以尝试先hybridize一段上去，然后就可以用restriction enzyme 去digest双链，这样可供选择的enzyme就多了。digest单链的酶可供选择的太少。
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奋斗并快乐着！
4楼2011-02-20 14:31:48
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xmy0523

新虫 (小有名气)
★
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刚在neb上看了一圈，没有能够内切单链DNA的好像。我觉得你可以试着我上面讲的做一下，我觉得应该可行。突然的idea，闪出来的。呵呵！
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5楼2011-02-20 14:43:51
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)

这个我考虑过，不过怕破坏已有的结构，不过loop区太长可能对后面的分析造成影响，谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了
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6楼2011-02-20 14:47:01
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
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引用回帖:
Originally posted by zhoujunnju at 2011-02-20 06:47:01:
这个我考虑过，不过怕破坏已有的结构，不过loop区太长可能对后面的分析造成影响，谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了

可以引用回复，方便人家看到。可以再次回复你的问题
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
7楼2011-02-20 14:53:33
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xmy0523

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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-20 15:15:36
引用回帖:
Originally posted by zhoujunnju at 2011-02-20 06:47:01:
这个我考虑过，不过怕破坏已有的结构，不过loop区太长可能对后面的分析造成影响，谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了

你可以设计的recognize region特异一点，让enzyme的能特异识别出来，一般不会影响其他单链和双链部分的。而且我觉得enzyme的特异性比化学法好多了吧。
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8楼2011-02-20 15:01:36
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xmy0523 at 2011-02-20 07:01:36:
你可以设计的recognize region特异一点，让enzyme的能特异识别出来，一般不会影响其他单链和双链部分的。而且我觉得enzyme的特异性比化学法好多了吧。

谢谢，这个思路我考虑过的，会为下面的性质分析带来影响的，我这几天一直考虑生物方法的，没有找到好的酶。现在已经开始考虑化学方法了。非常感谢你的讨论！
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9楼2011-02-20 15:21:57
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