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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】限制性核酸内切酶 已有4人参与

我想研究一下一个DNA结构中间loop区的作用,有好几个loop区,想找一种限制性DNA内切酶,可以选择性地切割DNA单链,这样可以研究loop区的作用,而不是那种从末端开始切起的内切酶,请问哪位可以提供商品化酶的信息,不胜感激!
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流

很多卖 限制性内切酶的啊, NEB的 ,Fermentas的比较好用。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-20 13:59:20
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)


找了,没有找到合适的,可能我遗漏了,谢谢
3楼2011-02-20 14:13:00
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xmy0523

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-02-20 14:53:06

突然有个想法,你的loop有多长,如果知道序列的话,可不可以尝试先hybridize一段上去,然后就可以用restriction enzyme 去digest双链,这样可供选择的enzyme就多了。digest单链的酶可供选择的太少。
奋斗并快乐着!
4楼2011-02-20 14:31:48
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xmy0523

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流

刚在neb上看了一圈,没有能够内切单链DNA的好像。我觉得你可以试着我上面讲的做一下,我觉得应该可行。突然的idea,闪出来的。呵呵!
奋斗并快乐着!
5楼2011-02-20 14:43:51
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)


这个我考虑过,不过怕破坏已有的结构,不过loop区太长可能对后面的分析造成影响,谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了
6楼2011-02-20 14:47:01
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhoujunnju at 2011-02-20 06:47:01:
这个我考虑过,不过怕破坏已有的结构,不过loop区太长可能对后面的分析造成影响,谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了

可以引用回复,方便人家看到。可以再次回复你的问题
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
7楼2011-02-20 14:53:33
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xmy0523

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-20 15:15:36
引用回帖:
Originally posted by zhoujunnju at 2011-02-20 06:47:01:
这个我考虑过,不过怕破坏已有的结构,不过loop区太长可能对后面的分析造成影响,谢谢你的建议。生物法不行我就要考虑化学切割了

你可以设计的recognize region特异一点,让enzyme的能特异识别出来,一般不会影响其他单链和双链部分的。而且我觉得enzyme的特异性比化学法好多了吧。
奋斗并快乐着!
8楼2011-02-20 15:01:36
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zhoujunnju

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xmy0523 at 2011-02-20 07:01:36:
你可以设计的recognize region特异一点,让enzyme的能特异识别出来,一般不会影响其他单链和双链部分的。而且我觉得enzyme的特异性比化学法好多了吧。

谢谢,这个思路我考虑过的,会为下面的性质分析带来影响的,我这几天一直考虑生物方法的,没有找到好的酶。现在已经开始考虑化学方法了。非常感谢你的讨论!
9楼2011-02-20 15:21:57
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