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wangly

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[交流] 【求助】熟悉普通和超高效的请赐教！

1. 峰展宽的判断标准是什么？存在的哪些不良后果？如何避免（越详细越好）？
2. 在梯度洗脱的过程中，是否出于保护柱子的考虑对梯度的变化有相应的设置原则？（比如几分钟内含量变化不超过多少？等等）
3. 对于超高效液相色谱，上面的问题又是什么什么答案呢？

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1楼 2011-01-24 15:32:48

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wangly

金虫 (小有名气)

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2楼2011-01-25 10:59:56

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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

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wangly(金币+5): 多谢了！ 2011-01-25 18:10:47

1.峰展宽如果柱子没问题的话一般都是流动相不合适造成。对于旧柱子会出现峰比较宽的情况，主要是拖尾，对称性差。后果的话，一是影响定量；二是影响分离度。解决方法对于新柱子出现这种情况一般要改变流动相，对于旧柱子可以对柱子进行再生处理。
2.梯度洗脱首要的是要考虑不同比例的流动相混合之后的互溶程度，比如你用大比例的盐和甲醇梯度，甲醇比例增大要考虑会不会析出盐的情况，这算是对柱子的保护吧。再一个是尽量减缓梯度变化，可以避免梯度时候很乱的峰，紫外检测器的话波长的选择也很重要，低波长容易产生干扰。
3.对于UPLC，不是很清楚，大致应该差不多，流动相的纯净度很重要。