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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

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Originally posted by silicare at 2011-01-20 08:25:44:
换引物吧,

是想换,可位置也就在那附近,除了直接与模板匹配,还可以采取什么别的手段吗?有人建议说加酶切位点什么的,具体是出于什么考虑呢,我暂时又不做克隆,搞不懂
11楼2011-01-20 08:35:09
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhp1984816 at 2011-01-20 00:47:02:
看电泳图应该不是二聚体,而是非特异扩增,你可以把退火温度再改高一点,或者可以直接试试72°二步法,还有就是你用的什么酶,有的酶特异性不好,选择更好一点的特异性强的酶

普通PCR用的Takara PrimeStar,也是高保真的;SYBR法为ABI的Fast 预混液
12楼2011-01-20 08:37:35
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