【求助/交流】PCR引物二聚体问题 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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金虫 (小有名气)

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Originally posted by silicare at 2011-01-20 08:25:44:
换引物吧，

是想换，可位置也就在那附近，除了直接与模板匹配，还可以采取什么别的手段吗？有人建议说加酶切位点什么的，具体是出于什么考虑呢，我暂时又不做克隆，搞不懂

11楼2011-01-20 08:35:09

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金虫 (小有名气)

引用回帖:

Originally posted by zhp1984816 at 2011-01-20 00:47:02:
看电泳图应该不是二聚体，而是非特异扩增，你可以把退火温度再改高一点，或者可以直接试试72°二步法，还有就是你用的什么酶，有的酶特异性不好，选择更好一点的特异性强的酶

普通PCR用的Takara PrimeStar，也是高保真的；SYBR法为ABI的Fast 预混液

12楼2011-01-20 08:37:35

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