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kong10

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白已有9人参与

提取酶时,采用硫酸铵沉淀,然后离心,但买看到蛋白,请问是哪里出现问题,离心速度一般要多大,还有整个沉淀操作过程中需要注意什么,样品量少,缓冲液也就几ml,非常感谢!
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inabcd

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我最近做的蛋白的硫酸铵沉淀,要么目的蛋白损失大,要么电泳图中杂带较多,很苦恼,求大家帮忙!硫酸铵沉淀沉淀目的蛋白,如何提高其纯度或者如何提高硫酸铵沉淀的效率,影响硫酸铵沉淀的因素有哪些?!
天行健,君子以自强不息!
12楼2012-04-24 09:07:54
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

加了多少硫酸铵呢?
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-12 23:54:41
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kong10

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-12 23:54:41:
加了多少硫酸铵呢?

80%饱和度,我从叶片提取,叶绿素含量太大,都不知道蛋白在哪,溶液不会变澄清吗?就是上清
3楼2011-01-13 18:08:37
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chaoen

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):欢迎参与讨论~~~ 2011-01-13 20:12:08
最近我也在做硫酸铵沉淀,大家一起讨论讨论
当加到80%的SAS应该很容易看到有悬浮物了吧,是不是可以直接视觉角度可以判断的啊?
如果是测定蛋白觉得没有的话,说明蛋白检测方法和叶绿素有干扰吧
4楼2011-01-13 19:44:17
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