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汕头大学海洋科学接受调剂
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鹏飞九万里

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr条带问题 已有9人参与

我以基因组为模板pcr四个基因,分别大小为800,1200,2700,4800,可是p出来的都是750bp左右,不知道是什么原因,请大家帮忙指导下,谢谢!
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funny8125

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我的意思不是引物污染,而是很多引物在PRIMER上面显示的很好,OLIGO上面也不错,可是真正做PCR的时候,引物会优先扩增你基因组里面其他的片段的,很多引物好不好不能只看评分什么的,要真正扩初目的条带才行,我建议你把偏小的片段回收测序下,看下,这个到底是什么东西。
人类一思考,上帝就发笑。
12楼2011-01-13 14:39:33
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waiwaidou_1983

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+3):负对照很重要啊~~鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-11 21:35:14
1 首先排除,负对照没有污染
2楼2011-01-11 20:13:26
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

是不是引物污染了?
有没有重复呢?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-01-11 20:38:04
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luzeyan

金虫 (小有名气)

杂带


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-01-11 20:38:04:
是不是引物污染了?
有没有重复呢?

有可能合成的杂带比较强
4楼2011-01-11 21:46:45
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