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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异丙醇沉淀DNA
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
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沉淀的DNA本来就基本看不到的

跑电泳检测
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
11楼2011-01-11 21:29:37
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luzeyan

金虫 (小有名气)

DNA含量少

★
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引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-01-11 14:48:18:
不知道为什么用异丙醇沉淀DNA，静置10分钟，离心10分钟，吸取上清后，怎么不见有DNA沉淀呀？？

DNA含量少或者看一下异丙醇有没有过了保存期
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12楼2011-01-11 21:37:13
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★
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lstt09nk(金币+3):热心的淀粉酶 2011-01-12 13:13:39
也许我还应该问楼主在做什么实验，前面处理是怎样的。沉淀里有DNA却看不到的情况我只在回收酶切产物的时候遇到，提取质粒和基因组DNA时没必要太干净也能满足我后续实验的要求，就没抽提得多干净，DNA也是能看到的。

楼主应该看一下新版主的置顶帖，就不会这样问问题了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2011-01-11 21:54:16
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jerry110

新虫 (小有名气)
★
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可以沉淀时间长点，放冰箱里沉淀，我们一般用0.6-0.8倍体积
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14楼2011-01-11 21:59:26
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
★
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最好用乙醇，我做过一次对照，冰浴的70%乙醇效果很好。
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微生物发酵
15楼2011-01-11 22:29:56
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
★
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本帖内容被屏蔽
16楼2011-01-11 22:34:33
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-01-11 22:34:33:

挺可信的，我们用0.6体积的异丙醇，之后冰上半小时，冷冻离心，10000r/min，20min.离心完直接倒掉异丙醇，用70%乙醇洗涤沉淀，晾干，要一定没有酒精气味为止，加入TE溶解即可。

你看着楼主做实验？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
17楼2011-01-12 00:37:59
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cxwu10016869

金虫 (著名写手)
★
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不知道LZ提取的是什么材料的DNA？用了多少材料啊？用什么方法提取的呢？
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18楼2011-01-12 01:16:58
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
Glycogen,糖原，就是DNA提取时用的，用于微量DNA提取中确定位置
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一直向前！
19楼2011-01-12 08:19:01
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hailiang1029

金虫 (正式写手)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2011-01-12 13:14:48
DNA少的话就看不到了，最好异丙醇-20度放一个小时，拿出来在离心，到上清的时候要小心，尽管看不见沉淀，还是有的...慢慢倒出上清，再用乙醇洗
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20楼2011-01-12 08:26:47
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