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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异丙醇沉淀DNA
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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】异丙醇沉淀DNA 已有18人参与

不知道为什么用异丙醇沉淀DNA，静置10分钟，离心10分钟，吸取上清后，怎么不见有DNA沉淀呀？？
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1楼 2011-01-11 14:48:18
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-01-11 22:34:33:

挺可信的，我们用0.6体积的异丙醇，之后冰上半小时，冷冻离心，10000r/min，20min.离心完直接倒掉异丙醇，用70%乙醇洗涤沉淀，晾干，要一定没有酒精气味为止，加入TE溶解即可。

你看着楼主做实验？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
17楼2011-01-12 00:37:59
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNA沉淀量少的话是看不到的。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-11 14:58:51
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xuchunhua2003

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
翱宇(金币+2):谢谢经验分享，其实我们实验室沉淀RNA也用异丙醇，但是不要时间过长！ 2011-01-11 21:10:05
静止时间比较短，你可以冰上放置半小时，一般温度低地话比较容易看到析出的DNA，如果还看不到就离心一下，看试管底部有没有白色沉淀，如果还看不到的话，就少量溶解一下，凝胶电泳检测是不是有DNA
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-01-11 15:12:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):哈哈，够严谨。 2011-01-12 07:35:43
1、异丙醇商品是否可信？
2、异丙醇用量如何？
3、加异丙醇之后是否冷冻？
4、离心转速和时间如何？
5、既然没有沉淀，你怎么判断何为上清？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-01-11 16:07:35
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