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fiona_

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求高手指点!关于用C43(DE3)表达膜蛋白已有4人参与

基因组信息显示我的目标蛋白为膜蛋白,371aa,稀有密码子有5个,不相连,通过结构分析也证明存在跨膜结构,最初用pET28a作为表达载体在BL21中表达,都是包涵体,后来把宿主换成C43(DE3),超声破碎后很浑浊,显微镜下看细胞是破碎的,蛋白电泳结果全都是包涵体,诱导条件也改过,没效果~~

现在换pGEX-4T-1作表达载体,也不知道结果会怎样~~

各位有没有遇到过这么情况,求指点,万分感谢~~

[ Last edited by fiona_ on 2011-1-6 at 15:58 ]
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
只是想说,很不容易。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2011-05-10 11:56:43
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晓想

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我想请问一下PGEX-4T-1是分泌型表达载体吧?你现在做出来了吗?我也是一直形成包涵体,想换个载体形成可溶性蛋白。。。谢谢。。。
3楼2011-05-10 09:38:17
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aoda123

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主,哪里可以买到C43菌株?
身体健康,工作顺利
5楼2012-12-24 11:46:21
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