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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】IPTG为什么要在OD 0.6~0.8时 加呢？
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xingxing342

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】IPTG为什么要在OD 0.6~0.8时 加呢？ 已有5人参与

IPTG为什么要在 OD 0.6~0.8时 加呢？ 要是摇过了再加会怎么样呢？
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1楼 2011-01-05 13:49:37
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
★
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从前人的优化实验看，一般是这样的，原因应该是IPTG本身具有毒性，不宜加多，且价格昂贵，只要最大效率达到诱导效果为上吧。
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严于律己，宽以待人
2楼2011-01-05 14:00:33
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
IPTG对细菌有毒性，会抑制细菌的生长
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3楼2011-01-05 14:10:06
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
OD 0.6~0.8时，菌株处于对数期，有最大活性，比较耐受IPTG毒性以及表达蛋白时的生存压力。
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Thank-you，so-blue.
4楼2011-01-05 14:16:32
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
在表达蛋白的时候，我们通常希望获得最大产量。

IPTG对菌落生长的抑制性比较明显。

在细菌生长后期，活菌数量减少，不适合蛋白的诱导表达；在细菌生长前期，细菌数量少，表达的蛋白也少。

IPTG加入的最佳时间是菌落生长到对数生长期的后期，但是还没有过对数生长期的这一段时间。
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
5楼2011-01-05 14:17:18
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
0.6-0.8只是个参考，具体还需要做个时间OD梯度确定最佳诱导时间，以及IPTG的量
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
6楼2011-01-05 14:17:23
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xingxing342

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-01-05 14:17:18:
在表达蛋白的时候，我们通常希望获得最大产量。

IPTG对菌落生长的抑制性比较明显。

在细菌生长后期，活菌数量减少，不适合蛋白的诱导表达；在细菌生长前期，细菌数量少，表达的蛋白也少。

IPTG加入的最佳 ...

谢谢~
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7楼2011-01-05 15:00:02
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