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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA降解问题求赐教
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钟心碧

金虫 (小有名气)

心碧
引用回帖:
Originally posted by smilefish06 at 2011-01-11 14:56:42:
一般情况下提取好的RNA放在-80度冰箱保存，能放半年吧，其实还是看提取过程中降解的厉害不厉害，提取的整个过程严格操作，还有跑电泳时电泳槽、制胶板梳子等要好好处理，不然可能提的还好，结果跑胶跑不好~

我的可能是提取出来的RNA中可能存在着Rnase，导致降解很厉害，我现在提出来就接着往下做了。谢谢赐教！
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灵魂是否存在
11楼2011-01-11 22:15:38
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xiaoshu8833

铁虫 (初入文坛)
★
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RNA本身就很脆弱~~我加了抑制酶的RNA放在-80下两个星期后也有部分降解~~所以最好是一周内完成，在就是不要一天内多次从-80拿出来再冻回去~~我也是新人~只是最近刚好一直在做RNA有关的~~希望有帮助
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Boncourage
12楼2011-01-28 21:17:31
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phoenix211

金虫 (小有名气)
★
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我试过提完后用乙醇保存在-80里，两个月后还能用。
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13楼2011-01-29 23:36:59
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ziman2003

银虫 (小有名气)
★
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RNA容易降解是公认的。但是，可以采用很多措施避免。比如裂解液中已经含有了RNA酶抑制剂，所以不要太担心，主要是在磨样的时候，要快速，不能让液氮干掉的时间过久；如果不能及时提取，将研磨后的组织放入裂解液，也就是我们常说的TRIZOL里面，可以立即放到-80。
提取的过程主要是在加入氯仿抽提的时候要小心。
其他的注意事项就是楼上几位提到的：戴口罩，勤换手套，DEPC处理耗材，DEPC水溶解沉淀......
提取出来的RNA，最好分装后，立即放置于-80。需要做实验室，取出一管。
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14楼2011-02-16 16:44:46
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manniecute

新虫 (初入文坛)
★
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你好 ，我前几天提了RNA准备做RT-PCR。可是测浓度的说话发现RNA浓度都太低了，才200多ng。。。请问我还可以做下去吗？
我以前提过都没有问题，浓度都有2000多ng 呢 。这几次不知道是啥原因，崩溃了。。。
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15楼2011-12-29 11:42:07
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)
★
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你用相关的器皿和耗材都要是无RAN酶 才能尽量降低RNA降解，RNA尽量不要保存
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16楼2012-02-10 22:35:10
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zhangliu1019

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我提完的RNA，放了3个月后还能用，就是比之前降解了~
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17楼2013-01-06 15:57:22
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