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钟心碧

金虫 (小有名气)

心碧

引用回帖:
Originally posted by smilefish06 at 2011-01-11 14:56:42:
一般情况下提取好的RNA放在-80度冰箱保存,能放半年吧,其实还是看提取过程中降解的厉害不厉害,提取的整个过程严格操作,还有跑电泳时电泳槽、制胶板梳子等要好好处理,不然可能提的还好,结果跑胶跑不好~

我的可能是提取出来的RNA中可能存在着Rnase,导致降解很厉害,我现在提出来就接着往下做了。谢谢赐教!
灵魂是否存在
11楼2011-01-11 22:15:38
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xiaoshu8833

铁虫 (初入文坛)


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RNA本身就很脆弱~~我加了抑制酶的RNA放在-80下两个星期后也有部分降解~~所以最好是一周内完成,在就是不要一天内多次从-80拿出来再冻回去~~我也是新人~只是最近刚好一直在做RNA有关的~~希望有帮助
Boncourage
12楼2011-01-28 21:17:31
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phoenix211

金虫 (小有名气)


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我试过提完后用乙醇保存在-80里,两个月后还能用。
13楼2011-01-29 23:36:59
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ziman2003

银虫 (小有名气)


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RNA容易降解是公认的。但是,可以采用很多措施避免。比如裂解液中已经含有了RNA酶抑制剂,所以不要太担心,主要是在磨样的时候,要快速,不能让液氮干掉的时间过久;如果不能及时提取,将研磨后的组织放入裂解液,也就是我们常说的TRIZOL里面,可以立即放到-80。
提取的过程主要是在加入氯仿抽提的时候要小心。
其他的注意事项就是楼上几位提到的:戴口罩,勤换手套,DEPC处理耗材,DEPC水溶解沉淀......
提取出来的RNA,最好分装后,立即放置于-80。需要做实验室,取出一管。
14楼2011-02-16 16:44:46
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manniecute

新虫 (初入文坛)


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你好 ,我前几天提了RNA准备做RT-PCR。可是测浓度的说话发现RNA浓度都太低了,才200多ng。。。请问我还可以做下去吗?
我以前提过都没有问题,浓度都有2000多ng 呢 。这几次不知道是啥原因,崩溃了。。。
15楼2011-12-29 11:42:07
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)


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你用相关的器皿和耗材都要是无RAN酶 才能尽量降低RNA降解,RNA尽量不要保存
16楼2012-02-10 22:35:10
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zhangliu1019

新虫 (初入文坛)


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我提完的RNA,放了3个月后还能用,就是比之前降解了~
17楼2013-01-06 15:57:22
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