24小时热门版块排行榜    

查看: 543  |  回复: 2
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看

朵尓丹娜

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助:测出的序列与原先的序列之间的相似性很低~

我把PCR扩增的300多bp的片段连接到pMD18载体上,然后转化到了JM109中,之后提取质粒,检测之后,分别送给华大和英俊公司测序,结果英俊公司测出的序列长度为520bp,而华大的测出的为300bp,比对之后,发现序列一致性为100%,但是长度不符,另外与我设计引物所用的序列之间的相似性非常低,不足10%。不知道哪个环节除了问题,所以请教各位帮一下忙!非常感谢~
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzxmichell

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

朵尓丹娜(金币+3, 博学EPI+1):虽然不是很全面,但是也提供了不错的思路! 2010-12-28 12:10:09
你设计的引物是特异引物吗?还是兼并引物?也或者你P出的是载体上的序列,不是你要的目的序列。
Nomoving!
2楼2010-12-27 16:43:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朵尓丹娜

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-27 16:43:22:
你设计的引物是特异引物吗?还是兼并引物?也或者你P出的是载体上的序列,不是你要的目的序列。

不是载体序列,与载体序列进行比对过了,不是载体序列!
我设计的是特异引物!我和公司的人联系,关于序列长短的问题已经解决,但是为什么与原来的序列之间没有相似性,这个问题还是没有思路!
3楼2010-12-28 12:34:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 朵尓丹娜 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 3/150 2026-08-07 21:49 by shalamu
[基金申请] 基金中了 +13 laoda193707 2026-08-06 13/650 2026-08-07 20:33 by tchen18
[基金申请] 关于filecode +3 布布和一二 2026-08-07 6/300 2026-08-07 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见