24小时热门版块排行榜    

查看: 547  |  回复: 2
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

朵尓丹娜

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助:测出的序列与原先的序列之间的相似性很低~

我把PCR扩增的300多bp的片段连接到pMD18载体上,然后转化到了JM109中,之后提取质粒,检测之后,分别送给华大和英俊公司测序,结果英俊公司测出的序列长度为520bp,而华大的测出的为300bp,比对之后,发现序列一致性为100%,但是长度不符,另外与我设计引物所用的序列之间的相似性非常低,不足10%。不知道哪个环节除了问题,所以请教各位帮一下忙!非常感谢~
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朵尓丹娜

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-27 16:43:22:
你设计的引物是特异引物吗?还是兼并引物?也或者你P出的是载体上的序列,不是你要的目的序列。

不是载体序列,与载体序列进行比对过了,不是载体序列!
我设计的是特异引物!我和公司的人联系,关于序列长短的问题已经解决,但是为什么与原来的序列之间没有相似性,这个问题还是没有思路!
3楼2010-12-28 12:34:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

yzxmichell

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

朵尓丹娜(金币+3, 博学EPI+1):虽然不是很全面,但是也提供了不错的思路! 2010-12-28 12:10:09
你设计的引物是特异引物吗?还是兼并引物?也或者你P出的是载体上的序列,不是你要的目的序列。
Nomoving!
2楼2010-12-27 16:43:22
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +8 布布和一二 2026-08-08 15/750 2026-08-09 11:33 by 布布和一二
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +3 布布和一二 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:15 by Lightingo
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
请填处理意见