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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 【求助】纯化特异性抗体的方法
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xiuxiu190318

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】纯化特异性抗体的方法

请问，特异性纯化IgG类抗体的方法有哪些？怎样利用特异性的抗原来纯化此类抗体呢？
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1楼 2010-12-12 09:29:00
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wenjunlin

木虫 (小有名气)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
过亲和层析柱吧。。。。。
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2楼2010-12-12 15:55:40
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无影

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-12 18:39:29
dream意(金币+1):呵呵 鼓励新虫交流 2010-12-12 22:25:17
.一种亲和纯化基因免疫所产生的特异性抗体的方法，该方法包括： a)将带有特定基因和6×His的真核细胞表达质粒免疫动物，产生含有基因特异性抗体的血清或卵黄免疫球蛋白粗提物； b)将该质粒在体外转染真核细胞或制备原核表达质粒转化原核细胞，培养后将细胞裂解液加到金属离子螯合树脂柱，由于重组蛋白带有6×His片段，可以与树脂中的金属离子螯合，被吸附于树脂表面，制成亲和层析柱； c)在进行特异抗体亲和层析时，将含有基因特异性抗体的血清或卵黄免疫球蛋白粗提物加到亲和层析柱，特异性抗体与相应的抗原重组蛋白充分结合后，先洗掉非特异性的抗体和杂蛋白，最后洗柱收集基因特异性的抗体。
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3楼2010-12-12 16:19:23
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xiuxiu190318

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 无影 at 2010-12-12 16:19:23:
.一种亲和纯化基因免疫所产生的特异性抗体的方法，该方法包括： a)将带有特定基因和6×His的真核细胞表达质粒免疫动物，产生含有基因特异性抗体的血清或卵黄免疫球蛋白粗提物； b)将该质粒在体外转染真核细胞或制 ...

请问常用的亲和层析柱填料包括哪些呢？对这方面还不太懂，希望多多指教
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4楼2010-12-13 08:24:58
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
蛋白A层析柱
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5楼2010-12-13 08:43:50
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hongyanxu

木虫 (著名写手)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
路过，帮顶
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6楼2010-12-13 08:44:03
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-13 21:11:04
本帖内容被屏蔽
8楼2010-12-13 09:23:49
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liuq82001

金虫 (小有名气)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
过路的来了
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10楼2011-03-04 16:34:01
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robert123

银虫 (小有名气)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
如果是兔抗体用proteinA好些，鼠抗用proteinG好些。GE公司有专门的纯化填料和预装柱卖，纯化效果不错，我们一直在用，现在他们预装柱5ml价格在5000了，有点小贵啊
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11楼2011-03-25 22:15:48
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lingxingcao

新虫 (小有名气)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
进来学习的。
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12楼2011-04-15 13:55:47
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xhjggl

木虫 (正式写手)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
用proteinA预装柱（BSP095-1  BSP095-2）或proteinG（SF022-PG）
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13楼2011-07-05 21:52:24
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zhongyun8668

铜虫 (初入文坛)
★
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
用的最多还是Protein A亲和层析柱，结合能力非常的强。只要一两ml，就可以纯化几十ml的抗血清，如果LZ需要的话，可以联系我，我可以提供给你一个我所用过的非常详细的纯化抗体的操作步骤。
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14楼2011-08-02 13:48:38
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nangyingyuan

金虫 (正式写手)
★
xiuxiu190318(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
1920674楼: Originally posted by zhongyun8668 at 2011-08-02 13:48:38
用的最多还是Protein A亲和层析柱，结合能力非常的强。只要一两ml，就可以纯化几十ml的抗血清，如果LZ需要的话，可以联系我，我可以提供给你一个我所用过的非常详细的纯化抗体的操作步骤。

你好，可以提供一下你“所用过的非常详细的纯化抗体的操作步骤”吗？迫切需要，谢谢
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15楼2012-12-25 11:16:03
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pch1967

铜虫 (正式写手)
★
xiuxiu190318(金币+1): 谢谢参与
抗体过亲和柱，常另外看你的抗体属性。
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16楼2012-12-29 07:05:11
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xinlan13147楼
2010-12-13 08:58   回复  
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
qinhy:求助帖请勿纯表情回复，多谢合作！ 2010-12-13 21:10:38
gwf24639楼
2011-02-25 08:48   回复  
xiuxiu190318(金币+1):谢谢参与
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