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dengxuepeng

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】透析袋是不是带电荷

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      最近做分离纯化,将以融合蛋白形式分泌表达的融合蛋白酶切,目的小肽——抗菌肽的分子量为2.4KDa,用透析袋(截留分子量为8000-14000,材质为再生纤维素膜)透析,是为了要透过部分。将透析袋内、外部分分别收集,冻干,做抗菌活性试验,结果:透析袋内部的部分有活性,透析液无活性,跟预期的相反,我怀疑透析袋带有电荷,将多肽分子吸附在透析袋上,而透不出去,顺便提一下,我的多肽在那个条件下带正电荷。但在网上查了查,每人这么提过,不知那位内行人士指点一下啊,不胜感激。
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我爱倩

银虫 (小有名气)


★ ★ ★
dengxuepeng(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~ 2010-12-08 20:08:08
是不是你的聚合酶还是包涵体性形式,所以分子量很大,透不过去,你可以吧透析液的PH调到蛋白的等电点试试吗。我在想不出问题了,
对了,新买的透析袋因该煮煮,去掉上面的盐离子。
2楼2010-12-08 20:01:36
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★
dengxuepeng(金币+1):谢谢参与
帮顶
3楼2010-12-08 21:25:26
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捕风的迷

新虫 (初入文坛)


★
dengxuepeng(金币+1): 谢谢参与
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去
4楼2016-11-08 11:14:19
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