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neversaydi

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Originally posted by shuaisuo1984 at 2010-12-14 11:01:13:
我们一般180KD的转膜是40v，3h，湿转，都能出来。希望对你有帮助~~~

恩谢谢电泳条件呢？也是80V ？多长时间呢？

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neverdaydie!

11楼2010-12-14 14:09:37

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abeywf

木虫 (小有名气)

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scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-12-17 00:06:06

我们有做。分离胶8%，层积胶6%。60v、18min，120v、70min。
转膜的话，4℃，40v过夜（15h），因为是大蛋白，所以需要时间比较长，效果才好。如果两块胶一起转的话，需要50v。展示一下我的作品吧。

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12楼2010-12-16 21:01:39

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shagrace

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我做的都是100V，1H，200mA，不管多大分子量，都出来了

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13楼2010-12-18 14:06:56

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neversaydi

木虫 (正式写手)

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Originally posted by shagrace at 2010-12-18 14:06:56:
我做的都是100V，1H，200mA，不管多大分子量，都出来了

那你们配的胶呢？
我们actin的条件差不多是 10% 5% 的胶
80V到红带出来，转成120V，一直到样品跑到底。
如果分子量180kd的话，你的这个条件，电泳能出来，那胶的浓度是多少？
跟楼上一样？转膜呢？
谢谢回答。我主要还是很菜，，，呵呵

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neverdaydie!

14楼2010-12-21 08:50:35

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shagrace

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引用回帖:

Originally posted by neversaydi at 2010-12-21 08:50:35:

那你们配的胶呢？
我们actin的条件差不多是 10% 5% 的胶
80V到红带出来，转成120V，一直到样品跑到底。
如果分子量180kd的话，你的这个条件，电泳能出来，那胶的浓度是多少？
跟楼上一样？转膜呢？ ...

最大的跑过120的，这么大的没跑过，Actin我用的是12%的。
你可以试试5%，先跑个MARKER看看

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15楼2010-12-24 14:08:03

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