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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】大鼠组织的WB

请教下各位,获得大鼠组织怎么做WB好呢,一般使用的蛋白酶抑制剂有哪些呢?哪些效果是比较好的。组织如何分离提取做WB呢?

[ Last edited by dianaofyezi on 2010-12-10 at 20:30 ]
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xhjggl

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dianaofyezi(金币+1):谢谢您的信息。非常有用。 2010-12-10 20:31:20
可以使用上海生工的全蛋白提取试剂盒


全蛋白提取试剂盒
Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit       
产品说明:本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀,酶活性分析,Pull down,EMSA等后续研究,但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂,可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质,本试剂盒可以使用50次。储存条件:2~8℃。
产品特点:
1.提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性;
2.整个操作过程只需要30分钟左右;
3.即可以用于培养细胞(50x107个),有可以用于动物组织(50x200mg)蛋白质的提取;
4.避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解,保持蛋白质的完整性和天然活性;
5.不需要超速度离心,可以同时处理多个样品。
编号        包装        价格        产地
BSP003        50 Assays        520        生工
4楼2010-12-10 18:48:02
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rivers_123

铁虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+5):鼓励新虫交流 2010-12-10 14:32:54
dianaofyezi(金币+1):谢谢你的参与! 2010-12-10 20:31:00
匀浆,离心,然后WB就行啦
2楼2010-12-10 14:11:26
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by rivers_123 at 2010-12-10 14:11:26:
匀浆,离心,然后WB就行啦

我想咨询下,这个WB对组织块的大小或者质量是否有要求呢?
3楼2010-12-10 17:57:07
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by xhjggl at 2010-12-10 18:48:02:
可以使用上海生工的全蛋白提取试剂盒


全蛋白提取试剂盒
Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit       
产品说明:本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂 ...

谢谢您的信息!不知道您用过该试剂盒了么?效果如何?
5楼2010-12-10 20:29:21
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