应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题
52/1返回列表
查看: 4041  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

oditors

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】trizol 提ＲＮＡ中的一些问题 已有17人参与

小弟要用Trizol提RNA，但是一直都提不好。查一些资料，总结出下面一下问题，希望大虾们给我解说一下！！！
1、提RNA过程中，那个异丙醇的量以什么为标准？我现在是定500ul。异丙醇需要预冷吗？常温下用影响大吗？我一直都是常温提的。
2、洗涤沉淀后，在空气干燥时，一般干燥多久啊？我有试过30分钟，也试过几分钟，但是最后复溶的效果都不好，浓度都偏低，而且30分钟时，原来明显的白色沉淀会溶解不见。
3、我提RNA的浓度一直都不好，有什么办法能够把浓度提上去啊！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-11-23 16:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oditors

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sai00fuji at 2010-11-25 23:21:42:
楼主的主要问题在于干燥时间过长了，10min已经是极限

其他什么异丙醇预不预冷都是浮云

另外我想说，既然楼主已经把RNA提出来了，只是浓度不行，那应该跟RNAse没什么太大关系。楼主防降解方面做得应该不错。

其实都差不多，我有同学能吧RNA的OD260值做到1点多，他的干燥都30分钟。
赞一下 回复此楼
17楼2010-11-27 00:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-23 18:36:07
1..异丙醇需要预冷,你应该知道为什么，冷的才容易沉淀~
2。不要过度干燥，和DNA一样，太干了不容易溶解
3。上面两点做好了，你浓度就上去了~
祝 你成功！
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2010-11-23 17:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢补充 2010-11-23 18:37:51
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-11-23 17:32:58:
1..异丙醇需要预冷,你应该知道为什么，冷的才容易沉淀~
2。不要过度干燥，和DNA一样，太干了不容易溶解
3。上面两点做好了，你浓度就上去了~
祝 你成功！

如果浓度偏低，出去提取的量有点少以外，还有可能污染了RNase，导致RNA的降解造成的。所以在整个操作过程中应该避免污染，防止皮肤和空气颗粒上的RNase污染。
赞一下(2人) 回复此楼
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
3楼2010-11-23 18:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
浓度低与你溶解的量有关，
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-11-23 20:41:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 07:24 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 07:12 by 9i7PCSZyMzot
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 07:12 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 07:06 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 07:01 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 4/200 2026-09-20 06:55 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:51 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭