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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】除杂蛋白
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杜杜

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】除杂蛋白 已有4人参与

提DNA的时候，跑电泳点样孔里很亮，是杂蛋白吗？有没有什么办法去除呢？
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1楼 2010-11-18 11:21:14
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丰之第

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 杜杜 at 2010-11-18 11:21:14:
提DNA的时候，跑电泳点样孔里很亮，是杂蛋白吗？有没有什么办法去除呢？

你太牛了。
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2楼2010-11-18 11:34:11
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杜杜

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 丰之第 at 2010-11-18 11:34:11:

你太牛了。

我不懂才提问题的，有什么不对的地方你可以指点，但不需要指指点点。
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3楼2010-11-18 11:44:49
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
貌似是杂蛋白啊，抽提的时候不小心混进去的吧，酚氯仿抽提下，要不重新提DNA```

对了 ，难道你电泳跑的原质粒麽

[ Last edited by feng__ on 2010-11-18 at 11:46 ]
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会不会偶尔也会想起我....
4楼2010-11-18 11:45:24
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杜杜

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2010-11-18 11:45:24:
貌似是杂蛋白啊，抽提的时候不小心混进去的吧，酚氯仿抽提下，要不重新提DNA```

对了 ，难道你电泳跑的原质粒麽

[ Last edited by feng__ on 2010-11-18 at 11:46 ]

不是质粒，是土壤DNA，酚氯仿抽提的话具体要怎么做呢，要加什么试剂呢？
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5楼2010-11-18 11:49:43
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-25 14:18:28
土壤DNA很容易有腐殖质去除不干净的情况出现
提取的时候出现杂蛋白，也有可能是离心后吸取上清的时候不小心把沉淀吸进去了，这样的话只能再抽提一次再取上清了
希望对你有帮助，祝顺利
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你的日子如何，你的力量也必如何！
6楼2010-11-25 10:39:37
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杜杜

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sxxuan at 2010-11-25 10:39:37:
土壤DNA很容易有腐殖质去除不干净的情况出现
提取的时候出现杂蛋白，也有可能是离心后吸取上清的时候不小心把沉淀吸进去了，这样的话只能再抽提一次再取上清了
希望对你有帮助，祝顺利

你的意思是多抽提几次吗？如果我的DNA是在跑电泳的时候看到点样孔里很亮，那是杂蛋白吗？这种情况下 我的DNA样品还能再除杂蛋白吗？谢谢
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7楼2010-11-25 14:17:28
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-11-30 08:37:39
可以测下OD，看看提取的DNA是不是有杂蛋白
如果有的话，之好再抽提或重新提取了
另外，胶的好坏，电泳缓冲液或loading buffer有没有杂质可能都会有影响
实在不行，就一样一样地试咯，不过如果Marker没这种情况，问题就在DNA
也有人试过把DNA浓度降低再上样的
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你的日子如何，你的力量也必如何！
8楼2010-11-25 15:09:47
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杜杜

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sxxuan at 2010-11-25 15:09:47:
可以测下OD，看看提取的DNA是不是有杂蛋白
如果有的话，之好再抽提或重新提取了
另外，胶的好坏，电泳缓冲液或loading buffer有没有杂质可能都会有影响
实在不行，就一样一样地试咯，不过如果Marker没这种情况 ...

DNA浓度太高电泳结果也会不好吗？会在点样孔跑不出来吗？
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9楼2010-11-25 17:35:44
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 杜杜 at 2010-11-25 17:35:44:

DNA浓度太高电泳结果也会不好吗？会在点样孔跑不出来吗？

浓度太高有时候跑成一团
其实很多时候胶孔都有很多亮点的，只要跑出来的条带是合乎你想要的就好了。不管正负对照都要做好
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你的日子如何，你的力量也必如何！
10楼2010-11-29 14:56:38
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