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dengjian1978

[交流] 请教一个关于过滤的问题

小弟最近做一个纯化实验.从发酵物里提取一个酸性物质.资料文献上能找的工艺都做的差不多了,想自己摸索一下其他途径:先用氢氧化钠把细胞内的酸性物质溶解出来,再滤取溶液进行下一步,现在碱液里面大量蛋白质(也许还有脂肪和多糖),又没法改变PH值或者加重金属来沉淀,即使是用了10%以上的硅藻土过滤都异常困难.印象中蛋白质是带正电荷的,加入些什么盐可以使其沉淀,不过忘记了.......现不知如何是好了,万望各位虫虫们提供些经验,先谢谢了
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dengjian1978

目标在胞内,需要先溶出。
一般的工艺是先过滤出菌渣,用合适的溶剂溶解后,再下一步。
现在我想不用溶剂,直接碱溶,再过滤,用水溶剂或者萃取或者调节PH沉淀目标再溶解进行下一步,可以少用很多溶剂,理论上有一定的可行性。
现在调碱溶菌后过滤不行,不完全是胶体影响过滤,而且有一些很细小的固体物质(也许是金属离子被沉淀,但现在手头没检验的东东)。慢慢的过滤下来一些液体也是很浑浊的,目测觉得是细小的固体颗粒(离心一下是很少量的一点固体),这些浑浊的东东不管是滤纸或者滤膜或者深层滤膜或者纸滤饼不用半小时就给我堵的死死的(切向流过滤我没条件,哭)。12000R/MIN5分钟离心效果很好,上清液的目标和杂质含量还是很让人满意的,证明如果解决过滤的话我的想法还是可行的,在试验室是可以用高速离心解决,不过别人问我要生产工艺我总不能说这个高速离心一下吧?几十吨的量啊。
实在想不出什么办法,希望各位虫虫帮忙。
今天还是睡觉先吧,困的不行啦。
3楼2006-06-03 02:43:59
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grapeberry

铁虫 (知名作家)


huyuchem(金币+1):谢谢
差不多就行了,干吗要过滤呢?离心沉降也很快!

发酵液简单澄清后,进阳离子树脂,正向/反向漂洗树脂,你可以发现,流出液混浊并有絮状物,水洗直到透明。这期间,检测你的产物是否有泄漏,泄漏跟吸附容量和吸附强度有关。

然后,用不同浓度的氨水,或者NaOH进行脱附,脱附液里,基本上没有糖,蛋白之类,可以做一个鉴别试验。
至于以后怎么处理,慢慢摸吧。

[ Last edited by grapeberry on 2006-6-2 at 16:38 ]
2楼2006-06-02 16:36:33
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grapeberry

铁虫 (知名作家)

如果物料不合适,过滤不是一种好方法。

尽管针对发酵行业,有很多精密的过滤设备,但是,过滤组件很容易阻塞,组件通常都很贵。

高速离心不是不可以,我看很好。
油脂工业有专用的碟式高速离心机,有的可以自动排渣。还有卧式高速离心机,用于环保污泥处理。不过都很贵。
4楼2006-06-03 07:58:08
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小小生

铜虫 (小有名气)

碟式高速离心机在食品行业也不是很贵的,普遍在用,但问题是你溶解的东东,调PH后沉淀的量究竟有多少,离心机脱脂脱杂都很好,很细微量少的用超滤纳滤也许会更好些。
幸福没有一劳永逸的捷径可走
5楼2006-06-03 08:29:20
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