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请教一个关于过滤的问题
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| 小弟最近做一个纯化实验.从发酵物里提取一个酸性物质.资料文献上能找的工艺都做的差不多了,想自己摸索一下其他途径:先用氢氧化钠把细胞内的酸性物质溶解出来,再滤取溶液进行下一步,现在碱液里面大量蛋白质(也许还有脂肪和多糖),又没法改变PH值或者加重金属来沉淀,即使是用了10%以上的硅藻土过滤都异常困难.印象中蛋白质是带正电荷的,加入些什么盐可以使其沉淀,不过忘记了.......现不知如何是好了,万望各位虫虫们提供些经验,先谢谢了 |
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2楼2006-06-02 16:36:33
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目标在胞内，需要先溶出。 一般的工艺是先过滤出菌渣，用合适的溶剂溶解后，再下一步。 现在我想不用溶剂，直接碱溶，再过滤，用水溶剂或者萃取或者调节PH沉淀目标再溶解进行下一步，可以少用很多溶剂，理论上有一定的可行性。 现在调碱溶菌后过滤不行，不完全是胶体影响过滤，而且有一些很细小的固体物质（也许是金属离子被沉淀，但现在手头没检验的东东）。慢慢的过滤下来一些液体也是很浑浊的，目测觉得是细小的固体颗粒（离心一下是很少量的一点固体），这些浑浊的东东不管是滤纸或者滤膜或者深层滤膜或者纸滤饼不用半小时就给我堵的死死的（切向流过滤我没条件，哭）。12000R/MIN5分钟离心效果很好，上清液的目标和杂质含量还是很让人满意的，证明如果解决过滤的话我的想法还是可行的，在试验室是可以用高速离心解决，不过别人问我要生产工艺我总不能说这个高速离心一下吧？几十吨的量啊。 实在想不出什么办法，希望各位虫虫帮忙。 今天还是睡觉先吧，困的不行啦。 |
3楼2006-06-03 02:43:59
4楼2006-06-03 07:58:08
5楼2006-06-03 08:29:20
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目标在溶液含量不高的，现在的阶段不会超过1%。如果前面一步过滤问题能解决的话，调酸后问题应该也是一样的。 现在是第一步溶解后过滤卡住了。昨天急昏头了，今天加热沉降了一下，已经能慢慢过滤了，不过滤液还是浑浊的。浑浊就很难控制过滤的效果，虽然过滤的损失可能很小。 碟式离心机滤液还是要通过滤袋和滤饼，和抽滤或者压滤原理是一样的，只不过过滤压力大很多，这和杯式类离心机分离过程不一样。如果真的连深层过滤都会堵住，碟式可能也很麻烦。大规模的话连续流离心机停留的时间估计不够，而且贵又难操作。 沉淀没条件确定是什么东西，只能大致的估计，命苦，有胶状（大约是蛋白）有很细的颗粒。处理这方面经验不多，能想到的就是加硅藻土搅拌，然后用纸滤板（滤纸在水里面搅碎过滤纸后压紧）。可是效果不好。 对细小颗粒的吸附活性炭要比硅藻土好，不过活性炭吸附我要的东西，哎呀呀，又要郁闷了。 |
6楼2006-06-03 11:02:01