应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
192/2返回列表上一页12
查看: 2852  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tian1203

银虫 (著名写手)
wwdxx2004(金币+1):谢谢，我的那个不是切不开，一切就呈图片上那种弥散状了，我觉得是质粒提取中的问题，质粒被污染了 2010-11-09 14:21:38
最近做双酶切也是切不下来，后来明白是质粒的问题，质粒浓度不够，有可能切开了，片段太淡看不出来。个人建议，把菌液要浑，同时多加几毫升。祝好运！
赞一下 回复此楼
别紧张，我不是什么好人...
11楼2010-11-09 09:53:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyanhrc

新虫 (小有名气)
wwdxx2004(金币+1):谢谢，质粒酶切前跑胶没有问题，一切就呈弥散状了，怀疑质粒被污染 2010-11-09 14:24:33
酶切前跑一下质粒，确定质粒没问题，再做酶切。
赞一下 回复此楼
12楼2010-11-09 10:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seeker91

木虫 (文坛精英)
知道质粒上有几个酶切位点吗？若只有一个位点，可能没有条带，就是你胶的情况。
赞一下 回复此楼
13楼2010-11-09 11:11:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seeker91

木虫 (文坛精英)
wwdxx2004(金币+1):质粒浓度不大，但是跑胶还是可以看见条带的，但是酶切就呈弥散状了，怀疑质粒污染 2010-11-09 14:26:41
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-11-07 14:59:23:


第二孔为marker,后几条带比较亮可能由于跑的时间比较短，没有分开，
7ul质粒拿去酶切的，20ul的体系，跑胶上样为10ul
结果就成这样了，不知道为什么？

7ul质粒浓度多大？
建议你单独跑一个质粒看看Marker为标，结果会很让你意外的。
赞一下 回复此楼
14楼2010-11-09 11:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seeker91

木虫 (文坛精英)
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-09 14:23:33
引用回帖:
Originally posted by seeker91 at 2010-11-09 11:14:59:

7ul质粒浓度多大？
建议你单独跑一个质粒看看Marker为标，结果会很让你意外的。

哦，错了，是单酶切位点的质粒的酶切物和质粒共同跑胶比对。
赞一下 回复此楼
15楼2010-11-09 11:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹林细雨

金虫 (著名写手)
★
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-10 08:27:56
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-10 10:21:19
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-11-08 16:18:04:
酶切弥散，一般都是质粒没提好的原因。建议换新试剂盒，或好点的试剂盒。

就是这个原因。从你的没有酶切的质粒看出来，你的质粒提的质量和纯度都不行，换个试剂盒或者自己配个buffer123都可以提的很好，祝你好运！
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-11-09 16:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-10 10:21:28
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-11 08:47:48
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-11-08 17:37:51:

有这个可能，质粒是低拷贝的，提取质粒时菌液较稀，质粒跑胶带也较弱，可是酶切也不至于都没有条带啊

能传个质粒提完后的图片上来吗？如果你的质粒中有基因组污染，再加上你的质粒本身浓度就很低，就会导致没切后没条带，一般是弥散的。
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
17楼2010-11-10 10:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2010-11-10 10:07:30:


能传个质粒提完后的图片上来吗？如果你的质粒中有基因组污染，再加上你的质粒本身浓度就很低，就会导致没切后没条带，一般是弥散的。

第一泳道为提取的质粒，2泳道为marker，3、4、5泳道为酶切后的，质粒是一万多的，费解。
赞一下 回复此楼
18楼2010-11-11 09:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-11 21:15:56
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-11-11 09:02:44:

第一泳道为提取的质粒，2泳道为marker，3、4、5泳道为酶切后的，质粒是一万多的，费解。

你的质粒是四条带，我觉得最上面一条带可能是基因组污染，但不是那么严重。你换个其他的酶（酶切位点单一的）切一下看看大小对不
赞一下 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
19楼2010-11-11 15:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wwdxx2004 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 326分，一志愿沪9，求生物学调剂 +3 刘墨墨 2026-04-05 3/150 2026-04-08 00:57 by 尼尼宁宁
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +12 努力奋斗112 2026-04-06 13/650 2026-04-07 23:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +19 努力奋斗112 2026-04-07 20/1000 2026-04-07 23:12 by JourneyLucky
[考研] 328求调剂 +13 lftmya 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:45 by JourneyLucky
[考研] 278求调剂 +13 范婷娜 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:42 by 来看流星雨10
[考研] 298求调剂 +5 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 7/350 2026-04-07 21:56 by 钉叮咚冬瓜
[考研] 275 求调剂 +4 Lei812514 2026-04-07 4/200 2026-04-07 20:55 by grlsj
[考研] 生物与医药273求调剂 +14 荔题南墙 2026-04-05 15/750 2026-04-07 16:29 by 可口可乐不加冰�
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 求调剂 +11 xzghyuj 2026-04-04 11/550 2026-04-06 11:49 by lijunpoly
[考研] 0860 求调剂 一志愿国科大 348 分 +3 WiiiP 2026-04-03 3/150 2026-04-05 17:43 by Ecowxq666！
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 一志愿大工学硕，求调剂 +4 yub0811 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:36 by 百灵童888
[考研] 0710生物学求调剂 +9 manman511 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:00 by zxl830724
[考研] 【求调剂】新能源材料本科，一志愿211，初试321 +6 求调剂学校， 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭