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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？

质粒跑胶有条带，质粒单酶切后却没有条带，呈弥散状，胶应该没有问题，酶也没有问题，费解？那个步骤能被污染呢，
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1楼2010-11-07 10:05:07
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-11 21:15:56
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-11-11 09:02:44:

第一泳道为提取的质粒，2泳道为marker，3、4、5泳道为酶切后的，质粒是一万多的，费解。

你的质粒是四条带，我觉得最上面一条带可能是基因组污染，但不是那么严重。你换个其他的酶（酶切位点单一的）切一下看看大小对不
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19楼2010-11-11 15:37:05
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j2

木虫 (正式写手)
★
wwdxx2004(金币+1): 2010-11-07 14:59:31
scelab(金币+1):谢谢交流！:tiger06: 2010-11-08 23:06:57
第二孔是marker吗？怎么后几条带这么亮？
酶切量是多少，会不会量低了看不出来
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2010-11-07 11:09:41
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by j2 at 2010-11-07 11:09:41:
第二孔是marker吗？怎么后几条带这么亮？
酶切量是多少，会不会量低了看不出来

第二孔为marker,后几条带比较亮可能由于跑的时间比较短，没有分开，
7ul质粒拿去酶切的，20ul的体系，跑胶上样为10ul
结果就成这样了，不知道为什么？
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3楼2010-11-07 14:59:23
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger06: 2010-11-08 23:07:05
个人认为酶切过程没有问题，因为切其他的质粒没有问题，难道是提取质粒过程污染，提取质粒用的试剂盒，以前也没有什么问题的，现在怎么会这样呢，实在费解是那个步骤污染了，期待高手指点！
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4楼2010-11-07 20:44:54
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