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【求助/交流】PCR问题求解，2段基因连接
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做PCR，用1上1下引物P出来一个基因，250bp，然后用2上2下p出另外一个基因，2500bp。现在我如何把这2个基因连接起来为模板继续p？ 我的做法是把1下和2上这两个引物设计成有12个bp的互补，让他们p出来的2个基因可以有12个碱基的互补，然后再用1上和2下对这个互补的基因进行PCR，但是具体该如何设计呢？P一次，发现是引物2聚体的。。变性和退火温度是如何依据的？ 请高手指点。。。 |
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