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rejoice814

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞荧光成像方法或细胞染色技术 已有1人参与

我制备了一种能发荧光的材料,修饰上ramos细胞适体使之与细胞结合,但荧光成像时只能看到材料的荧光不能看到细胞或细胞的轮廓,有人建议将细胞染色,我想问问ramos细胞怎么染色,最好不要将细胞弄死。或者能提供不用染色就能在荧光成像中看到细胞的方法更佳,十分感谢!
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dj04164

木虫 (正式写手)

★ ★
americanyk(金币+2):感谢积极回帖交流! 2010-10-28 02:21:40
rejoice814(金币+2):谢谢! 2010-10-28 11:01:21
引用回帖:
Originally posted by rejoice814 at 2010-10-27 10:56:35:


我做的那个材料,在荧光成像那个仪器上用的是紫色的光激发最亮,发橙色的光
照片我现在还没有,就是黑色的背景散布着很多橙色的亮团~ 哎 我解释不能了 你看我还有哪儿没说清楚~ 另外你说的“伪彩”。。。。。 ...

你说的“荧光成像那个仪器”是啥呀?“紫色激发光”是400左右?发橙色的光。 ok
你这样去买一支Hoechst 33342 http://www.invitrogen.com/site/u ... 。紫外激发光365左右 Hoechst 发射480左右的蓝光,然后视野不动,激发你的染料,两张照片合在一起,成了。伪彩嘛改天再说吧。你暂时用不到。
13楼2010-10-27 23:20:16
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qingbo62

木虫 (正式写手)


shileinjut(金币+1):感谢积极参与! 2010-10-25 19:45:10
rejoice814(金币+4): 2010-10-26 08:28:45
肿瘤细胞应该差不多,想看轮廓的话就染细胞骨架或者细胞膜,还有一种染料可以染细胞质的,算是看轮廓。

你可以用明场看细胞,再和材料的荧光叠加,就不用染色了。
2楼2010-10-25 19:42:58
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rejoice814

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qingbo62 at 2010-10-25 19:42:58:
肿瘤细胞应该差不多,想看轮廓的话就染细胞骨架或者细胞膜,还有一种染料可以染细胞质的,算是看轮廓。

你可以用明场看细胞,再和材料的荧光叠加,就不用染色了。

能具体说说是什么染料吗?染色的过程复杂吗?是不是要将细胞弄死?十分感谢啊!我对细胞这方面不怎么了解

[ Last edited by rejoice814 on 2010-10-26 at 11:19 ]
3楼2010-10-26 08:31:27
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dj04164

木虫 (正式写手)


rejoice814(金币+4): 2010-10-26 11:15:58
shileinjut(金币+1):感谢积极回帖交流! 2010-10-26 12:21:45
要考虑你的材料荧光的激发和发射范围,选择另一通道的荧光染料同时标记。
细胞荧光染色当然可以不弄死细胞,很多活体染料可以使用。
你的材料的荧光拍一张照片,同样视野中透射光再拍一张,合在一起。
4楼2010-10-26 11:09:23
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