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梦想天使

银虫 (初入文坛)

[求助] 有关蛋白质浓缩问题

最近在做酶的活力测定,酶液浓度很低我想用一些方法浓缩,但是要保证酶的活力,有没有什么好的方法浓缩?我采用了透析法,透析液的浓度很高这样会不会对其酶的活力有所影响?谢谢各位虫友?
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liwhite

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zzgyb(金币+2):楼主发帖24小时之内回帖回答问题额外奖励 2010-10-29 13:30:28
提取的酶液为减少纯化操作容积,通常先进行浓缩。工业上可用真空减压浓缩、薄膜浓缩、冷冻浓缩和逆向渗透作用进行浓缩。对于少量酶液下述方法浓缩更合适:

  用葡聚糖凝胶(分子筛)浓缩:取相当于酶液量1/5的干葡聚糖凝胶G15或G25,分次加入酶液中,搅拌30min,使凝胶吸水膨胀,进行吸滤。经重复数次操作即可在短时间内把酶液浓缩至所需的体积。也可将酶液装于透析袋内,埋入干凝胶中,袋内酶液也可得到浓缩。 医学教.育网搜集整理

  用聚乙二醇浓缩:将稀酶液装入透析袋内,袋外复以聚乙二醇,袋内水份被袋外的聚乙二醇所吸收,在短时间内可以达到浓缩的目的,得到所需的浓酶液。

  用超滤法浓缩:超滤技术在其可筛分范围内分离酶分子时不发生“相态”变化,可以避免酶蛋白变性,且分离度快,所以愈来愈被广泛采用。各种不同孔径的超滤膜,适用于实验室规模及一定工业规模的酶液浓缩。如国产二醋酸纤维素制成10~200埃孔径的超滤膜,用于实验室规模固氮酶液的脱盐和浓缩,效果良好。
2楼2010-10-20 09:35:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
zzgyb(金币+2):楼主发帖24小时之内回帖回答问题额外奖励 2010-10-29 13:30:40
楼上说的G15或25价格1g就要十元以上,而且吸收膨胀后凝胶颗粒表面也会有酶,可能有损失,楼主慎用。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2010-10-20 19:58:45
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tangqiang312

银虫 (初入文坛)


zzgyb(金币+1):楼主发帖24小时之内回帖回答问题额外奖励 2010-10-29 13:30:46
可以考虑一下用泡沫分离的方法!
4楼2010-10-25 18:09:00
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