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梦想天使

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[求助] 有关蛋白质浓缩问题

最近在做酶的活力测定，酶液浓度很低我想用一些方法浓缩，但是要保证酶的活力，有没有什么好的方法浓缩？我采用了透析法，透析液的浓度很高这样会不会对其酶的活力有所影响？谢谢各位虫友？

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1楼 2010-10-20 09:20:37

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liwhite

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
zzgyb(金币+2):楼主发帖24小时之内回帖回答问题额外奖励 2010-10-29 13:30:28

提取的酶液为减少纯化操作容积，通常先进行浓缩。工业上可用真空减压浓缩、薄膜浓缩、冷冻浓缩和逆向渗透作用进行浓缩。对于少量酶液下述方法浓缩更合适：

　　用葡聚糖凝胶（分子筛）浓缩：取相当于酶液量1/5的干葡聚糖凝胶G15或G25，分次加入酶液中，搅拌30min，使凝胶吸水膨胀，进行吸滤。经重复数次操作即可在短时间内把酶液浓缩至所需的体积。也可将酶液装于透析袋内，埋入干凝胶中，袋内酶液也可得到浓缩。医学教.育网搜集整理

　　用聚乙二醇浓缩：将稀酶液装入透析袋内，袋外复以聚乙二醇，袋内水份被袋外的聚乙二醇所吸收，在短时间内可以达到浓缩的目的，得到所需的浓酶液。

　　用超滤法浓缩：超滤技术在其可筛分范围内分离酶分子时不发生“相态”变化，可以避免酶蛋白变性，且分离度快，所以愈来愈被广泛采用。各种不同孔径的超滤膜，适用于实验室规模及一定工业规模的酶液浓缩。如国产二醋酸纤维素制成10～200埃孔径的超滤膜，用于实验室规模固氮酶液的脱盐和浓缩，效果良好。