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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR竟然P不出来 已有2人参与

各位虫友;
  最近我将一个重组质粒PET-28A(带有外源基因)转化到野生型的大肠杆菌中,能在KAN抗性平板上长出来,也能在抗性培养基中长出来。。。但是我做菌落PCR时就是无法将目的基因片段P出来,是什么原因呢?如果说质粒没有转进去,那应该无法在抗性板上长出来才对啊。。。PCR体系的条件之类的应该也没有什么问题。。还请各位指点,非常感谢!!!
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的目的片段是基因组还是在质粒上?
严于律己,宽以待人
3楼2010-10-20 11:13:34
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taigongzaici

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题我也遇到过,也给技术打过电话,他们的解释是因为质粒没转进去,附着在边缘,所有有抗性筛选。建议重做
2楼2010-10-20 08:30:34
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