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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR竟然P不出来
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR竟然P不出来 已有2人参与

各位虫友；
  最近我将一个重组质粒PET-28A（带有外源基因）转化到野生型的大肠杆菌中，能在KAN抗性平板上长出来，也能在抗性培养基中长出来。。。但是我做菌落PCR时就是无法将目的基因片段P出来，是什么原因呢？如果说质粒没有转进去，那应该无法在抗性板上长出来才对啊。。。PCR体系的条件之类的应该也没有什么问题。。还请各位指点，非常感谢！！！
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1楼 2010-10-20 00:31:57
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我也遇到过，也给技术打过电话，他们的解释是因为质粒没转进去，附着在边缘，所有有抗性筛选。建议重做
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2楼2010-10-20 08:30:34
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的目的片段是基因组还是在质粒上？
赞一下(1人) 回复此楼
严于律己，宽以待人
3楼2010-10-20 11:13:34
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