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lv34257740

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】转座子方面 已有2人参与

有人做转座子方面的实验吗?急需帮助啊~
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zhijiangli

金虫 (正式写手)


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我研究生的时候做过植物方面的转座子实验,不知道你要做的是那个方面的?是哪一类转座子?
缘分这东西O(∩_∩)O~
2楼2010-10-19 13:50:00
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lv34257740

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhijiangli at 2010-10-19 13:50:00:
我研究生的时候做过植物方面的转座子实验,不知道你要做的是那个方面的?是哪一类转座子?

是mariner转座子,有一个含有这个转座子的质粒,可是提了多少次结果都不对,宿主菌的培养有什么条件吗?
3楼2010-10-19 14:55:05
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zhijiangli

金虫 (正式写手)

★ ★
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zxt2001(金币+1):感谢参与交流! 2010-10-19 19:08:21
我不知道你的目的是什么,你是提取了多次没有提取出质粒呢,还是质粒里面没有克隆出这个转座子呢?
宿主菌的培养条件应该没有什么要求吧。
祝 试验顺利
缘分这东西O(∩_∩)O~
4楼2010-10-19 16:30:49
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lv34257740

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhijiangli at 2010-10-19 16:30:49:
我不知道你的目的是什么,你是提取了多次没有提取出质粒呢,还是质粒里面没有克隆出这个转座子呢?
宿主菌的培养条件应该没有什么要求吧。
祝 试验顺利

我是要从宿主菌中把质粒提取出来,然后用提取到的质粒进行下一步实验,质粒就是由转座子和转座酶基因构成的,没有其他基因,可是我提了好多次质粒,电泳结果显示条带大小不一,酶切也不正确,它难道还会变不成?
5楼2010-10-19 18:03:52
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zhijiangli

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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zxt2001(金币+2):感谢热心应助! 2010-10-20 19:14:22
引用回帖:
Originally posted by lv34257740 at 2010-10-19 18:03:52:

我是要从宿主菌中把质粒提取出来,然后用提取到的质粒进行下一步实验,质粒就是由转座子和转座酶基因构成的,没有其他基因,可是我提了好多次质粒,电泳结果显示条带大小不一,酶切也不正确,它难道还会变不成?

转座子虽然非常活跃,但是在质粒中变的可能性不大,基本可以排除。
提取的质粒电泳时会不止一条带,理论上是三条带,但是实际在试验过程中什么情况都可能发生,建议你跑电泳时点一下marker,看是否是你的目的条带,其他的条带又是多大的,估计可以帮助你分析结果,另外,不知道你单纯质粒电泳和酶切以后电泳条带有没有差别(酶切也分完全酶切和不完全酶切)。

最后就是最好请教一下同实验室的同志们,因为他们以前也可能碰到过你累死的问题,或许可以帮你解决。
缘分这东西O(∩_∩)O~
6楼2010-10-20 14:59:23
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lv34257740

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhijiangli at 2010-10-20 14:59:23:



转座子虽然非常活跃,但是在质粒中变的可能性不大,基本可以排除。
提取的质粒电泳时会不止一条带,理论上是三条带,但是实际在试验过程中什么情况都可能发生,建议你跑电泳时点一下marker,看是否是你的目 ...

请问你用的转座子是自己构建的吗?
7楼2010-10-20 19:36:08
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zhijiangli

金虫 (正式写手)


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我 做的是 从植物基因组中克隆 可能转座活跃的MULE转座子,用的是比较基因组学,没有构建转座子。
缘分这东西O(∩_∩)O~
8楼2010-10-21 11:16:18
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