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[交流] 求助

想请教一下如果想克隆一个你感兴趣的基因，具体方案要怎么做？

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1楼 2006-05-19 22:28:23

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免疫学小弟

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1616.1
散金: 50
帖子: 911
在线: 20.3小时
虫号: 206479
注册: 2006-03-04
性别: GG
专业: 免疫学研究新技术与新方法

0.25

实在是不知道哦！

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努力提高自己，帮助大家提高，共同提高。我为虫虫，虫虫为我！

2楼2006-05-19 22:49:28

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eulota

金虫 (著名写手)

应助: 38 (小学生)
金币: 410.3
散金: 1088
红花: 19
帖子: 1267
在线: 263.3小时
虫号: 250629
注册: 2006-05-13
专业: 植物遗传学

具体方案太多了,我还是说说一般的程序吧:
1.从生物(植物\动物\微生物)中获得目的基因的mRNA.
方法:可先合成核苷酸探针,提取RNA,用探针钓取目的mRNA.
2.反转录PCR,得到目的基因的cDNA.
3.PCR,并在目的基因两端设计酶切位点.(已得到大量目的基因)
4.将目的基因连接到T载体上,可进一步得到大量克隆.
5.将目的基因亚克隆至表达载体,即可得到基因表达.

欢迎讨论,指正!

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3楼2006-05-20 07:46:05

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ljw0331

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 229215

谢谢！

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4楼2006-05-21 23:12:56

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