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ljw0331

[交流] 求助

想请教一下如果想克隆一个你感兴趣的基因，具体方案要怎么做？
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1楼 2006-05-19 22:28:23
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免疫学小弟

木虫 (正式写手)

0.25

实在是不知道哦！
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努力提高自己，帮助大家提高，共同提高。我为虫虫，虫虫为我！
2楼2006-05-19 22:49:28
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eulota

金虫 (著名写手)
具体方案太多了,我还是说说一般的程序吧:
1.从生物(植物\动物\微生物)中获得目的基因的mRNA.
  方法:可先合成核苷酸探针,提取RNA,用探针钓取目的mRNA.
2.反转录PCR,得到目的基因的cDNA.
3.PCR,并在目的基因两端设计酶切位点.(已得到大量目的基因)
4.将目的基因连接到T载体上,可进一步得到大量克隆.
5.将目的基因亚克隆至表达载体,即可得到基因表达.

    欢迎讨论,指正!
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3楼2006-05-20 07:46:05
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ljw0331

谢谢！
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4楼2006-05-21 23:12:56
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