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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞传代时怎么都吹不下来啊！
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-10 16:02:34:


要不这样，试试把浮起来的细胞吸到一个皿中培养，仍贴壁的冲下来的细胞放另外一个皿培养。以后看看这两批细胞到底有没有区别，同时对你的实验处理因素反应如何。因为肿瘤细胞传代太多，就会老化，那些老的细胞 ...

恩，好的，我试试你给的建议，谢谢了。
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11楼2010-10-10 21:47:48
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我本兽医

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-11 10:30:44
richenim(金币+2): 2010-10-11 12:22:13
对于这种比较难消化的细胞，个人认为消化的时间长一点，问题不大。楼主考虑的对，消化时间过长，的确影响细胞的生长状态。但是，这种细胞的理化特性已经如此了，也只能忍了。如果你觉得大量胰酶+长时间的消化不好的话，可以尝试以下方法：PBS洗--加入适量胰酶37°消化至细胞之间有空隙（静下观察）----弃去可见的胰酶，残留在细胞间隙的剩余胰酶足够用来继续消化，当然，还是在37°中进行。预祝实验顺利
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12楼2010-10-10 23:02:35
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道你的胰酶使用时间是否太长，如果不是新鲜的就更换新鲜的胰酶试试。
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52187644
13楼2010-10-11 09:25:00
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vivit1986

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
richenim(金币+1): 2010-10-11 12:25:22
吹不下来，可能是手法问题，问问你周围的朋友，看他们是怎么吹的，还有就是在吹的时候确实有一部分细胞是吹不下来的，如果不是太多，其实也没多大问题，反正我传细胞的时候也是会有一些细胞在上面的。
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14楼2010-10-11 11:14:10
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alxz

铁杆木虫 (职业作家)

其实我是一只大老鼠
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢分享 2010-10-11 11:49:06
不终止消化，直接吹打
吹打完了再终止消化
这样会把细胞打得很均匀
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风起，夜未央~流年，乱浮生
15楼2010-10-11 11:41:47
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alxz

铁杆木虫 (职业作家)

其实我是一只大老鼠
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
richenim(金币+3): 2010-10-11 12:26:56
引用回帖:
Originally posted by alxz at 2010-10-11 11:41:47:
不终止消化，直接吹打
吹打完了再终止消化
这样会把细胞打得很均匀

这个起码值5个金币吧……
我们老师都不让我们传给其他课题组学生的
哈哈
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风起，夜未央~流年，乱浮生
16楼2010-10-11 11:52:21
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 我本兽医 at 2010-10-10 23:02:35:
对于这种比较难消化的细胞，个人认为消化的时间长一点，问题不大。楼主考虑的对，消化时间过长，的确影响细胞的生长状态。但是，这种细胞的理化特性已经如此了，也只能忍了。如果你觉得大量胰酶+长时间的消化不好 ...

谢谢了，这种方法我也试过，等细胞之间有间隙的时候，其实还是有少量的细胞漂浮着，我就把胰酶弃去了，再继续消化，实在是难消化啊，就只有再加胰酶哦！呵呵。。。
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17楼2010-10-11 12:25:09
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by vivit1986 at 2010-10-11 11:14:10:
吹不下来，可能是手法问题，问问你周围的朋友，看他们是怎么吹的，还有就是在吹的时候确实有一部分细胞是吹不下来的，如果不是太多，其实也没多大问题，反正我传细胞的时候也是会有一些细胞在上面的。

我做细胞都一年多了啊，我养了三种细胞的，就只有这种细胞不好吹哦，应该不是手法的问题吧，呵呵。。。它吹不下来的是占大部分哦！
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18楼2010-10-11 12:26:31
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richenim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by alxz at 2010-10-11 11:52:21:

这个起码值5个金币吧……
我们老师都不让我们传给其他课题组学生的
哈哈

3个够不够啊？等我试了，有效果再给你30个吧，呵呵。。。。
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19楼2010-10-11 12:28:13
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zplipeng

金虫 (著名写手)
★
richenim(金币+1):谢谢参与
学习了。。。。。
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
20楼2010-10-11 12:34:54
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