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richenim金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】细胞传代时怎么都吹不下来啊！ 已有5人参与
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细胞刚从上海中科院买回来的时候每次要消化5min左右）（0.25%的胰酶—0.02%EDTA），而且要吹很多，但是最后还是有一些（少部分）细胞吹不下来哦！ 传代多次或复苏的细胞就越不容易消化了啊，细胞都已经变圆变亮了，但终止消化后吹打却有很大一部分细胞吹不下来啊！每次只有等消化至细胞脱落了60%—70%的时候再终止消化才能把细胞吹下来哦？但每次消化这么久对细胞液不好，所以也不是个办法，希望各位高手能指点一二哦！ |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-11 10:30:44
richenim(金币+2): 2010-10-11 12:22:13
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dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-11 10:30:44
richenim(金币+2): 2010-10-11 12:22:13
| 对于这种比较难消化的细胞，个人认为消化的时间长一点，问题不大。楼主考虑的对，消化时间过长，的确影响细胞的生长状态。但是，这种细胞的理化特性已经如此了，也只能忍了。如果你觉得大量胰酶+长时间的消化不好的话，可以尝试以下方法：PBS洗--加入适量胰酶37°消化至细胞之间有空隙（静下观察）----弃去可见的胰酶，残留在细胞间隙的剩余胰酶足够用来继续消化，当然，还是在37°中进行。预祝实验顺利 |
12楼2010-10-10 23:02:35
dianaofyezi
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2楼2010-10-09 12:04:26
richenim
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4楼2010-10-09 12:07:12
dianaofyezi
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5楼2010-10-09 12:13:12
