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richenim

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞传代时怎么都吹不下来啊!已有5人参与

细胞刚从上海中科院买回来的时候每次要消化5min左右)(0.25%的胰酶—0.02%EDTA),而且要吹很多,但是最后还是有一些(少部分)细胞吹不下来哦!
传代多次或复苏的细胞就越不容易消化了啊,细胞都已经变圆变亮了,但终止消化后吹打却有很大一部分细胞吹不下来啊!每次只有等消化至细胞脱落了60%—70%的时候再终止消化才能把细胞吹下来哦?但每次消化这么久对细胞液不好,所以也不是个办法,希望各位高手能指点一二哦!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-10-09 23:33:08
richenim(金币+1): 2010-10-10 14:47:54
引用回帖:
Originally posted by richenim at 2010-10-09 20:43:28:

我一般都是用PBS洗去残余的培养基然后再加胰酶消化的哦!它不是消化到快要浮起来,而是已经都浮起来了啊?这样对细胞的损伤会不会很大啊?而且我怕消化太久会有很多死细胞或碎片,所以每次将消化下来的细胞再离 ...

其实没有看到细胞的实际情况真的好难帮你分析
另外,用枪吹的力道会比滴管的大一点,如果你用滴管的话可以试试用1ml枪
8楼2010-10-09 22:17:55
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

richenim(金币+1): 2010-10-09 12:07:20
这是什么细胞呢?有没有尝试更换下细胞瓶或其他培养条件试试,还是说这个细胞的特性就是如此呢?
52187644
2楼2010-10-09 12:04:26
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richenim

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-10-09 12:04:26:
这是什么细胞呢?有没有尝试更换下细胞瓶或其他培养条件试试,还是说这个细胞的特性就是如此呢?

是人前列腺癌细胞PC-3,尝试了更换培养瓶的啊,其他培养条件?是指什么?这个细胞确实是贴壁紧,不怎么好消化,但好像好不至于如此哦!
4楼2010-10-09 12:07:12
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

ATCC介绍是说要消化5-15min哦,不过没有使唤过这种细胞,没有发言权哦。
52187644
5楼2010-10-09 12:13:12
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