24小时热门版块排行榜    

查看: 2836  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

richenim

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞传代时怎么都吹不下来啊! 已有5人参与

细胞刚从上海中科院买回来的时候每次要消化5min左右)(0.25%的胰酶—0.02%EDTA),而且要吹很多,但是最后还是有一些(少部分)细胞吹不下来哦!
传代多次或复苏的细胞就越不容易消化了啊,细胞都已经变圆变亮了,但终止消化后吹打却有很大一部分细胞吹不下来啊!每次只有等消化至细胞脱落了60%—70%的时候再终止消化才能把细胞吹下来哦?但每次消化这么久对细胞液不好,所以也不是个办法,希望各位高手能指点一二哦!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

richenim

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-09 12:50:09:
有些细胞就是这样的啦
消化之前先用胰酶或者PBS洗掉表面残余的培养基
然后再加胰酶消化,放培养箱里面消化
差不多了再吹
也可以消化到快浮起来,加完全培养基中止
吹打其实对细胞也是很损的
像这类贴壁这么 ...

我一般都是用PBS洗去残余的培养基然后再加胰酶消化的哦!它不是消化到快要浮起来,而是已经都浮起来了啊?这样对细胞的损伤会不会很大啊?而且我怕消化太久会有很多死细胞或碎片,所以每次将消化下来的细胞再离心30s左右,弃去含有胰酶的培养基再换上新的培养基培养哦,这样每次离心可不可以哦?
7楼2010-10-09 20:43:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

richenim(金币+1): 2010-10-09 12:07:20
这是什么细胞呢?有没有尝试更换下细胞瓶或其他培养条件试试,还是说这个细胞的特性就是如此呢?
52187644
2楼2010-10-09 12:04:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

richenim

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-10-09 12:04:26:
这是什么细胞呢?有没有尝试更换下细胞瓶或其他培养条件试试,还是说这个细胞的特性就是如此呢?

是人前列腺癌细胞PC-3,尝试了更换培养瓶的啊,其他培养条件?是指什么?这个细胞确实是贴壁紧,不怎么好消化,但好像好不至于如此哦!
4楼2010-10-09 12:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

ATCC介绍是说要消化5-15min哦,不过没有使唤过这种细胞,没有发言权哦。
52187644
5楼2010-10-09 12:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +5 想上学吖吖 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:56 by 23Postgrad
[考研] 288求调剂 +15 于海海海海 2026-03-19 15/750 2026-03-19 22:41 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +7 手机用户 2026-03-17 7/350 2026-03-18 14:34 by vgtyfty
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
信息提示
请填处理意见