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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】金黄葡萄球菌 抗菌实验
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btscu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】金黄葡萄球菌 抗菌实验 已有4人参与

小弟是学材料的， 最近在做抗菌实验。
基本操作是将100ul 105 CFU/ml的细菌PBS溶液 滴到我的样品上，
空白silicon wafer作为negative 参照。然后seal 放入incubator  接触3h后 用10ml PBS溶液冲洗样品  然后 取100ul spread on agar,
将agar 放入37度  incubator24h 然后数colony的数量。

现在问题是 空白的silicon wafer 会杀死50%的金黄葡萄球菌。 我很疑惑 重复做了很多次实验都是这个结果。
对于E。coli 空白silicon wafer上 死掉4%左右。
分析了一下原因  是否金黄葡萄球菌 更喜欢贴敷到表面， 10ml PBS溶液也冲不下来
这样导致了 错误的抗菌率？ 或者其他原因导致金黄葡萄球菌死亡？
空白硅片 用pirahan溶液清洗 然后大量的水浸泡  最后70%乙醇消毒

谢谢各位~
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1楼 2010-09-24 00:17:01
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-27 12:04:41
reasonspare(金币+10):应楼主要求，转赠microxy虫友 10金 2010-09-28 05:47:09
大肠杆菌属于革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性菌，细胞壁结构不同，不同的抗菌剂对它们反应有可能不同。能否介绍一下你的材料的抗菌机理？这样可以进一步的详细的分析。
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2楼2010-09-26 13:59:28
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lily19861202

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-09-27 12:05:08
reasonspare(金币+10):应楼主要求，转赠lily19861202虫友 10金 2010-09-28 05:46:04
你的实验事实据你来说是没有什么问题的。
      有个概念我认为楼主混淆了，你实验中用的硅白片并不是阴性对照，而是空白对照。空白对照是为了消除试样载体本身对细菌的影响，而不是细菌洗脱液的存活率为100%。因此无论得到的结果是什么，只要相对稳定，就说明这个空白对照是可以使用的。
      至于为什么两种洗脱液中细菌的存活率不同，就是两种细菌的性质决定的了。
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3楼2010-09-27 10:16:02
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btscu

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币-10):应楼主要求，扣除10金转赠lily19861202 2010-09-28 05:45:18
引用回帖:
Originally posted by lily19861202 at 2010-09-27 10:16:02:
你的实验事实据你来说是没有什么问题的。
      有个概念我认为楼主混淆了，你实验中用的硅白片并不是阴性对照，而是空白对照。空白对照是为了消除试样载体本身对细菌的影响，而不是细菌洗脱液的存活率为100%。因 ...

非常感谢。 麻烦斑竹帮我从我账户上转10个金币给这位虫友。
恩  应该是空白对照  我怀疑金黄葡萄球菌 更喜欢贴敷表面
所以 定了荧光试剂 准备用confucos 显微镜 观察 样品表面 细菌的死 活状态
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4楼2010-09-28 04:35:54
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btscu

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币-10):应楼主要求，扣除10金转赠microxy 2010-09-28 05:46:43
引用回帖:
Originally posted by microxy at 2010-09-26 13:59:28:
大肠杆菌属于革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性菌，细胞壁结构不同，不同的抗菌剂对它们反应有可能不同。能否介绍一下你的材料的抗菌机理？这样可以进一步的详细的分析。

同样谢谢这位虫友 ， 再次麻烦斑竹帮我转10个金币给这位虫友

样品上的活性物质 是阳离子季铵盐 侧链  一种常见的 抗菌修饰
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5楼2010-09-28 04:37:58
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liol2009

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by btscu at 2010-09-28 04:35:54:
非常感谢。 麻烦斑竹帮我从我账户上转10个金币给这位虫友。
恩  应该是空白对照  我怀疑金黄葡萄球菌 更喜欢贴敷表面
所以 定了荧光试剂 准备用confucos 显微镜 观察 样品表面 细菌的死 活状态

革兰氏阳性菌更容易被搞死，这个结果应该是正常的吧

俺也做抗菌，不过是橡胶的抗菌，目前貌似没有橡胶材料抗菌的实验方法可供参考，苦恼中，不知振荡烧瓶可行否。
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早睡早起方能养身
6楼2011-09-29 01:03:16
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