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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平 已有38人参与


如上图所示，分离胶凝固后，把水层倒掉，发现胶面不是以前那种很直的一条水平线，而是弯弯曲曲的，而且分离胶的底部有一小段老是凝不上，从制胶架上取下后底部那段直接流下来，就是液体，所有的储备液都重新配了，APS也是现配的，也混匀了，可还是老样子，都重复N多次了，也不知道是什么原因，一样的操作，想想以前也没有遇到过这种问题，只犯晕，大家有碰到这种现象啊？
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Betterlatethannever
1楼 2010-09-16 18:47:19
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
假如是没有凝结好，那么由于凝胶和水是不相溶的，所以即使不用水封，那么界面也必然是平的，现在不平，说明不是凝结得不好，而是凝结得太好了，注意过TEMED没？我怀疑用太多了，导致加进去时就已经有些凝结，加进去后在流得还没有平的时候就凝结，导致即使加了水也压不了了。

胶面中间稍高，猜测楼主是从中间加进去凝胶的，我喜欢从一侧加，从没有试过胶面不平，我喜欢流动的感觉。在做凝胶混匀时注意看液体的流动状态，越粘稠就表示快要凝结了，我都是在它有一点点粘稠之前就加了，所以加进去之后能够欢畅地流动。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2010-9-17 at 14:25 ]
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
17楼2010-09-17 14:20:19
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feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1):也许 2010-09-26 10:43:49
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试
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2楼2010-09-16 19:18:41
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zhyzx

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1):我一直水封 改下试试 2010-09-26 10:44:10
建议你不用水封了，改用无水乙醇试试
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3楼2010-09-16 20:14:11
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-09-16 19:18:41:
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试

应该不是温度的原因，按说温度高点胶凝的更快点，再说实验室开着空调呢，以前这样做也没碰到什么问题，至于时间凝了一个多小时，也不短了
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Betterlatethannever
4楼2010-09-16 21:24:59
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