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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平 已有38人参与


如上图所示，分离胶凝固后，把水层倒掉，发现胶面不是以前那种很直的一条水平线，而是弯弯曲曲的，而且分离胶的底部有一小段老是凝不上，从制胶架上取下后底部那段直接流下来，就是液体，所有的储备液都重新配了，APS也是现配的，也混匀了，可还是老样子，都重复N多次了，也不知道是什么原因，一样的操作，想想以前也没有遇到过这种问题，只犯晕，大家有碰到这种现象啊？
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Betterlatethannever
1楼 2010-09-16 18:47:19
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草豆

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我认为可能是以下原因：
原因一：
可能是APS（需避光保存）失效了。溶解的时候注意放在耳边听一下，如果有啪啪的声音，说明没问题，反之，就是失效了（现配也没用），导致胶凝的不好，再加上有点漏胶，所以胶面不平。
原因二：
电泳槽没有密封好。我们是用煮沸的琼脂把各个边边缝缝都封一边（老式电泳槽），冷却后，用水检查密封性，不漏后，再灌分离胶，用水压平（如果发现水面不平的话，要及时的补满水，不然的话由于各个地方受压力不同，也会导致胶面不平）。
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11楼2010-09-17 00:24:43
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feiye2214

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):也许 2010-09-26 10:43:49
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试
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2楼2010-09-16 19:18:41
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zhyzx

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):我一直水封 改下试试 2010-09-26 10:44:10
建议你不用水封了，改用无水乙醇试试
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3楼2010-09-16 20:14:11
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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-09-16 19:18:41:
是不是实验室温度太高啊，看样子是胶凝的不够啊，多等一段时间试试

应该不是温度的原因，按说温度高点胶凝的更快点，再说实验室开着空调呢，以前这样做也没碰到什么问题，至于时间凝了一个多小时，也不短了
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Betterlatethannever
4楼2010-09-16 21:24:59
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